Anticorps polyclonal anti-SPHK2 pour WB, ELISA - Q9NRA0

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du SPHK2

• Catalyse la phosphorylation de la sphingosine pour former la sphingosine-1-phosphate (SPP), un médiateur lipidique ayant des fonctions intra- et extracellulaires ; agit également sur d'autres bases sphingoïdes et se lie aux phosphoinositides. Références connexes : PMID:12954646, PMID:19168031
• Contrairement au SPHK1 de survie, le SPHK2 régule positivement les niveaux de céramide intracellulaire, inhibe la croissance cellulaire et favorise l'apoptose. Références connexes : PMID:16118219
• Dans les mitochondries, le SPP produit par le SPHK2 se lie à PHB2 pour moduler l'assemblage de la cytochrome-c oxydase et la respiration mitochondriale. Références connexes : PMID:20959514
• Dans le noyau, le SPHK2 interagit avec HDAC1/HDAC2, inhibant leur activité désacétylase via le SPP, ce qui entraîne une augmentation de l'acétylation des histones H3-K9, H4-K5 et H2B-K12, régulant ainsi l'expression génique épigénétique. Références connexes : PMID:19729656
• Le SPHK2 nucléaire peut également inhiber la synthèse d'ADN et la progression du cycle cellulaire. Références connexes : PMID:12954646, PMID:16103110
• Se localise dans plusieurs compartiments cellulaires, notamment le cytoplasme, le noyau, le réticulum endoplasmique, la membrane interne mitochondriale et la membrane lysosomale.
• Principalement exprimé dans le rein, le foie et le cerveau, l'isoforme 1 étant la forme majeure dans la plupart des tissus ; détecté au niveau protéique dans le cortex cérébral et l'hippocampe. Références connexes : PMID:10751414, PMID:29615132, PMID:16103110
• Annoté comme une kinase liant l'ATP impliquée dans le métabolisme des lipides ; présente un épissage alternatif et des modifications par phosphorylation.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre la région N-terminale (aa 1-165) du SPHK2 humain, un domaine conservé entre les isoformes ; l'anticorps peut reconnaître plusieurs variants d'épissage.
• Pour le Western blot (WB), envisagez d'utiliser des lysats de lignées cellulaires ou de tissus connus pour exprimer le SPHK2, tels que HEK293, HeLa, ou des échantillons de rein/foie/cerveau, avec des contrôles de charge appropriés.
• Dans l'ELISA, optimisez la concentration de l'anticorps de revêtement et les conditions de tampon en fonction de votre format de plaque et de votre système de détection ; incluez une courbe standard pour la quantification.
• Comme le SPHK2 est associé aux membranes, incluez des détergents doux dans les tampons de lyse pour assurer une extraction et une détection efficaces.

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