Anticorps polyclonal anti-SPHK2 pour WB et ELISA - Q9NRA0

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de SPHK2

• SPHK2 (SK2) est une sphingosine kinase qui catalyse la phosphorylation de la sphingosine en sphingosine-1-phosphate (S1P). Elle agit également sur la D-érythro-dihydrosphingosine, la D-érythro-sphingosine et la L-thréo-dihydrosphingosine, et se lie aux phosphoinositides. Références associées : PMID:12954646, PMID:19168031
• Contrairement à SPHK1 qui favorise la survie cellulaire, SPHK2 régule positivement les niveaux intracellulaires de céramide, inhibe la croissance cellulaire et augmente l'apoptose. Références associées : PMID:16118219
• Dans les mitochondries, le S1P généré par SPHK2 se lie à PHB2 pour moduler l'assemblage du cytochrome-c oxydase et la respiration mitochondriale via le complexe IV. Références associées : PMID:20959514
• SPHK2 nucléaire interagit avec HDAC1 et HDAC2 ; la production de S1P inhibe leur activité désacétylase, conduisant à une augmentation de l'acétylation des histones H3-K9, H4-K5 et H2B-K12, régulant ainsi l'expression épigénétique des gènes. Références associées : PMID:19729656
• Dans le noyau, SPHK2 peut supprimer la synthèse d'ADN et la progression du cycle cellulaire. Références associées : PMID:12954646, PMID:16103110
• SPHK2 se localise dans plusieurs compartiments subcellulaires : cytoplasme, noyau, réticulum endoplasmique, membrane interne mitochondriale et membrane du lysosome.
• Elle est fortement exprimée dans le rein, le foie et le cerveau adultes, avec un enrichissement dans le cortex cérébral et l'hippocampe ; l'isoforme 1 est prédominante dans la plupart des tissus. Références associées : PMID:10751414, PMID:29615132, PMID:16103110

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 1-165, une région N-terminale ; il faut prendre en compte que cet anticorps peut détecter la SPHK2 pleine longueur (~69 kDa) et potentiellement les isoformes contenant l'extrémité N-terminale. Validez la spécificité dans votre système d'échantillon correspondant.
• Pour le Western Blot, les lysats de rein, foie ou cerveau humains sont des contrôles positifs recommandés compte tenu du profil d'expression élevée ; des échantillons de souris peuvent également être testés pour confirmer la réactivité croisée.
• Compte tenu des multiples localisations subcellulaires de SPHK2, prévoyez des conditions de fractionnement subcellulaire ou de traitement appropriées lors de l'analyse de la distribution de la protéine.
• Pour les applications ELISA, prévoyez une optimisation de la paire d'anticorps et des conditions de dosage ; cet anticorps polyclonal peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection dans un format ELISA sandwich après validation appropriée.

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