Anticorps polyclonal de lapin anti-SPHK1 pour WB et ELISA - Q9NYA1

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la sphingosine kinase 1

• La SPHK1 catalyse la phosphorylation de la sphingosine pour former la sphingosine-1-phosphate (S1P), un médiateur lipidique aux fonctions intra- et extracellulaires. Elle agit également sur la D-érythro-sphingosine et, dans une moindre mesure, sur la sphinganine, mais pas sur d'autres lipides tels que le diacylglycérol, la céramide ou le phosphatidylinositol. Références associées : PMID:11923095 PMID:20577214 PMID:23602659
• Contrairement à la SPHK2 pro-apoptotique, la SPHK1 a un effet négatif sur les niveaux de céramide intracellulaire, améliore la croissance cellulaire et inhibe l'apoptose. Références associées : PMID:16118219
• Via son produit S1P, la SPHK1 stimule l'activité ligase E3 ubiquitine de TRAF2 et favorise l'activation de NF-kappa-B en réponse à la signalisation TNF, conduisant à la sécrétion d'IL17. Références associées : PMID:20577214
• En réponse au TNF, la SPHK1 régule négativement l'induction de RANTES par la voie de signalisation p38 MAPK. Références associées : PMID:23935096
• La SPHK1 est impliquée dans le trafic membranaire endocytaire, recrutée vers les endosomes dilatés, et joue un rôle dans les stades tardifs de la maturation endosomale et de la fusion membranaire indépendamment de son activité kinase. Références associées : PMID:24929359 PMID:28049734
• Dans les cellules de Purkinje, la SPHK1 est impliquée dans la régulation de la fusion autophagosome-lysosome en réponse au VEGFA. Références associées : PMID:25417698
• La SPHK1 présente également une activité sérine acétyltransférase sur PTGS2/COX2 de manière dépendante de l'acétyl-CoA, modulant la neuroinflammation en favorisant la sécrétion neuronale de médiateurs spécialisés de résolution de l'inflammation.
• La localisation subcellulaire comprend le cytoplasme, le noyau, la membrane cellulaire, la membrane endosomale, les puits recouverts de clathrine et la synapse.
• Large expression, avec les niveaux les plus élevés dans le foie adulte, le rein, le cœur et le muscle squelettique ; également exprimée dans le cortex cérébral. Références associées : PMID:29662056

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène est une protéine recombinante couvrant les acides aminés 50-384 de la SPHK1 humaine, qui comprend le domaine catalytique. Pour le Western blot, envisagez un poids moléculaire prédit d'environ 43 kDa. Validez la spécificité de l'anticorps en utilisant des lysats de tissus humains ou de souris appropriés, car une réactivité croisée est signalée pour les deux espèces.
• Pour l'ELISA, optimisez la concentration d'enrobage de l'anticorps et les conditions de dosage. Envisagez d'utiliser la protéine SPHK1 recombinante comme témoin positif.
• Puisque la SPHK1 est impliquée dans plusieurs voies de signalisation, vérifiez la détection dans des conditions de stimulation pertinentes (par exemple, traitement au TNF) pour évaluer le contexte fonctionnel.

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