Anticorps monoclonal de lapin anti-SPHK1 pour WB et ELISA - Q9NYA1

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la SPHK1

• La SPHK1 (sphingosine kinase 1), également appelée SK1 et acétyltransférase SPHK1, est une enzyme multifonctionnelle codée par le gène SPHK1 (ID génique : 8877) chez l'homme. Elle appartient à la famille des sphingosine kinases et joue un rôle clé dans le métabolisme des sphingolipides et la signalisation cellulaire.
• Catalyse la phosphorylation de la sphingosine pour former le sphingosine 1-phosphate (S1P), un médiateur lipidique bioactif avec des fonctions intracellulaires et extracellulaires. Agit spécifiquement sur la D-érythro-sphingosine et la sphinganine, mais pas sur d'autres lipides. Références associées : PMID:11923095, PMID:20577214, PMID:23602659
• Contrairement à la SPHK2 proapoptotique, elle régule négativement les niveaux intracellulaires de céramide, stimule la croissance cellulaire et inhibe l'apoptose. Références associées : PMID:16118219
• Médie la signalisation TNF : via le S1P, elle stimule l'activité ubiquitine ligase E3 de TRAF2 et favorise l'activation de NF-kappa-B, conduisant à la sécrétion d'IL-17. Elle régule également négativement l'induction de RANTES via la voie p38 MAPK en réponse au TNF. Références associées : PMID:20577214, PMID:23935096
• Elle présente une activité sérine acétyltransférase sur PTGS2/COX2 de manière dépendante de l'acétyl-CoA, influençant la sécrétion neuronale de médiateurs spécialisés de résolution (SPM) comme la 15-R-lipoxine A4 pendant la neuroinflammation.
• Elle se localise dans le cytoplasme, le noyau, la membrane cellulaire, la membrane des endosomes, les puits recouverts de clathrine et les synapses, ce qui reflète ses rôles variés dans la signalisation et le trafic membranaire.
• Elle est largement exprimée, avec les niveaux les plus élevés dans le foie adulte, les reins, le cœur, le muscle squelettique et le cortex cérébral. Références associées : PMID:29662056
• Elle contient des domaines de liaison à l'ATP et à la calmoduline ; elle est régulée par phosphorylation et épissage alternatif (mots-clés UniProt : Kinase, Transférase, Phosphoprotéine, Épissage alternatif).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène a été conçu contre la région N-terminale (aa 1-160) de la SPHK1 humaine (NP_001136074.1). Cette région est commune à plusieurs isoformes et peut fournir une détection large ; vérifiez l'alignement de séquence pour des besoins spécifiques à une isoforme.
• Pour le Western blot, une bande proche de 43 kDa est attendue, mais les modifications post-traductionnelles ou l'épissage alternatif peuvent entraîner des décalages de bande. Optimisez les contrôles de chargement et la dilution de l'anticorps en utilisant des lysats positifs et négatifs pertinents.
• Pour l'ELISA, envisagez d'associer cet anticorps avec des anticorps de capture/détection validés pour la SPHK1. Validez la spécificité du test en utilisant la protéine recombinante et des contrôles négatifs appropriés.
• Utilisez des lysats de tissus ou de cellules avec une expression connue de SPHK1 (par ex. foie, rein ou cortex cérébral) comme contrôles positifs, et incluez un contrôle négatif (par ex. knock-down de SPHK1 ou tissu à faible expression).

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