Anticorps polyclonal anti-SPHK1 pour IHC-P et ELISA - Q9NYA1

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de SPHK1

• SPHK1, également connue sous le nom de SPHK, est une sphingosine kinase qui catalyse la phosphorylation de la sphingosine pour former le sphingosine-1-phosphate (S1P), un médiateur lipidique clé doté de fonctions intracellulaires et extracellulaires (PubMed:11923095, PubMed:20577214, PubMed:23602659). Références associées : PMID:11923095, PMID:20577214, PMID:23602659
• Contrairement à la SPHK2 pro-apoptotique, la SPHK1 favorise la croissance cellulaire et inhibe l’apoptose. Elle participe également au trafic membranaire endocytaire et à la maturation des endosomes indépendamment de son activité kinase (PubMed:16118219, PubMed:24929359, PubMed:28049734). Références associées : PMID:16118219, PMID:24929359, PMID:28049734
• Par l’intermédiaire du S1P, la SPHK1 stimule l’activité de la ligase E3 de l’ubiquitine TRAF2 et favorise l’activation de NF-kappa-B en réponse à la signalisation du TNF, entraînant la sécrétion d’IL-17 ; elle régule également négativement l’induction de RANTES via la voie MAPK p38 (PubMed:20577214, PubMed:23935096). Références associées : PMID:20577214, PMID:23935096
• En outre, la SPHK1 possède une activité sérine acétyltransférase sur PTGS2/COX2, activité renforcée par la sphingosine, et favorise la sécrétion neuronale de médiateurs spécialisés pro-résolution lors de la neuroinflammation.
• Au niveau subcellulaire, la SPHK1 se localise dans le cytoplasme, le noyau, la membrane cellulaire, la membrane des endosomes, les puits recouverts de clathrine et les synapses.
• La SPHK1 est largement exprimée, avec des niveaux maximaux dans le foie, les reins, le cœur et les muscles squelettiques adultes ; elle est également détectée au niveau protéique dans le cortex cérébral.
• Les mots-clés mettent en évidence ses rôles dans le métabolisme lipidique, la liaison à la calmoduline, la phosphorylation et l’épissage alternatif.

Recommandations expérimentales et conseils techniques

• L’immunogène utilisé est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 201 à 300 de la SPHK1 humaine (NP_001136074.1). Les anticorps polyclonaux générés contre cette région peuvent reconnaître plusieurs isoformes ou formes modifiées post-traductionnellement ; les chercheurs doivent vérifier leur spécificité dans le contexte de leurs expériences.
• Pour l’IHC-P, envisagez d’utiliser des tissus présentant une forte expression de SPHK1 (par exemple le foie ou les reins) comme contrôles positifs, et optimisez empiriquement la récupération antigénique ainsi que la dilution de l’anticorps.
• En ELISA, l’anticorps peut être utilisé pour détecter la SPHK1 dans des lysats cellulaires ou des préparations de protéines recombinantes ; des conditions appropriées de blocage et de lavage doivent être déterminées.
• Une réactivité croisée a été rapportée chez la souris et le rat, mais l’homologie de séquence de la région immunogène chez ces espèces doit être vérifiée afin de confirmer la reconnaissance attendue.
• En tant qu’anticorps polyclonal, il peut convenir à la détection de la SPHK1 dénaturée ou native, mais les conditions de Western blot dénaturant peuvent ne pas être optimales compte tenu des limites de l’application ; toute utilisation dans d’autres applications nécessite une validation.

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