Anticorps polyclonaux de lapin anti-SPARC pour IHC-P, ELISA - P09486

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la SPARC

• La SPARC (Secreted Protein Acidic and Rich in Cysteine), également connue sous le nom d'ostéonectine ou BM-40, est une glycoprotéine matricellulaire qui module les interactions cellule-matrice et régule la croissance cellulaire.
• Elle se lie aux ions calcium et cuivre, et interagit avec divers composants de la matrice extracellulaire, notamment les collagènes, la thrombospondine et l'albumine, ainsi qu'avec des facteurs de croissance comme le PDGF et les membranes cellulaires.
• La SPARC contient deux domaines de liaison au calcium : un domaine acide de faible affinité qui lie 5 à 8 ions Ca²⁺ et un motif EF-hand de haute affinité.
• La protéine est sécrétée dans l'espace extracellulaire et est un composant de la membrane basale, ce qui correspond à son rôle dans le remodelage et la réparation tissulaires.
• Les caractéristiques clés incluent de multiples ponts disulfure, une glycosylation et son association avec l'ostéogenèse imparfaite en cas de mutation.
• La SPARC a été identifiée par séquençage direct des protéines et des approches de protéomique, soulignant son abondance et sa pertinence clinique.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre la protéine SPARC mature (résidus 18 à 303), ce qui inclut les deux domaines de liaison au calcium ; envisagez des étapes de récupération d'antigène et de blocage pour l'IHC-P afin de préserver les épitopes dépendants de la conformation.
• Pour l'ELISA, immobilisez l'antigène dans des conditions qui maintiennent l'intégrité des ponts disulfure et évaluez la réactivité croisée avec d'autres protéines matricellulaires si nécessaire.
• Lors de la coloration de tissus humains, de souris ou de rat, validez l'anticorps sur l'espèce concernée en incluant des témoins positifs et négatifs, car les anticorps polyclonaux peuvent présenter une variabilité d'un lot à l'autre.
• Envisagez de tester des dilutions allant de 1:50 à 1:500 pour l'IHC-P et de 1:1000 à 1:5000 pour l'ELISA comme points de départ, en optimisant en fonction du système de détection et du type d'échantillon.

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