Anticorps polyclonal de lapin anti-SPAM1 pour WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P38567

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de SPAM1

• SPAM1 code pour l'hyaluronidase PH-20, également appelée molécule d'adhésion des spermatozoïdes 1, hyaluronoglucosaminidase PH-20 et protéine de surface des spermatozoïdes PH-20.
• La protéine est une glycoprotéine de membrane cellulaire ancrée par un glycosylphosphatidylinositol (GPI) appartenant à la famille des glycoside hydrolases, possédant une activité catalytique d'hyaluronoglucosaminidase.
• Elle joue un rôle central dans la fécondation en digérant l'acide hyaluronique, principal composant de la matrice extracellulaire des cellules du cumulus entourant l'ovocyte, facilitant ainsi la pénétration des spermatozoïdes vers la zone pellucide.
• Localisée sur la membrane des spermatozoïdes, SPAM1 médie les événements d'adhésion et de reconnaissance cellulaire lors de la liaison spermatozoïde-ovule.
• Son expression est principalement restreinte au tissu testiculaire.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent une glycosylation N-liée, un ancrage GPI et la formation de ponts disulfure essentiels à la stabilité structurale ; la protéine subit également un épissage alternatif pour générer des isoformes variantes.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond à une région centrale conservée de SPAM1 humain, permettant potentiellement une réactivité croisée avec les orthologues de souris et de rat comme indiqué ; cependant, un alignement des séquences doit être vérifié pour les variants d'espèces spécifiques.
• Pour le western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 58 kDa ; l'expression endogène peut être spécifique du testicule, des lysats de tissus appropriés (par exemple, testicule humain, de souris ou de rat) doivent donc être utilisés comme contrôles positifs.
• En immunofluorescence et immunohistochimie, une perméabilisation est nécessaire pour la détection des épitopes intracellulaires ; les conditions optimales de fixation et de perméabilisation peuvent nécessiter une optimisation empirique pour différents types d'échantillons.
• Pour les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; envisagez de titrer la concentration d'anticorps pour établir une plage dynamique appropriée pour le test.

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