Anticorps monoclonal de lapin anti-SPAM1 pour WB, IHC-P, ELISA - P38567

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de SPAM1

• SPAM1 (molécule d'adhésion des spermatozoïdes 1), également désignée sous les noms d'hyaluronidase PH-20, d'hyaluronoglucosaminidase PH-20 ou de protéine de surface des spermatozoïdes PH-20, est une glycoprotéine membranaire ancrée par un glycosylphosphatidylinositol (GPI).
• Elle agit comme une hyaluronidase, digérant enzymatiquement l'acide hyaluronique de la matrice des cellules du cumulus entourant l'ovocyte, facilitant ainsi la pénétration des spermatozoïdes pendant la fécondation.
• SPAM1 est essentielle à l'adhésion spermatozoïde-ovule et assure le contact initial entre le spermatozoïde et le complexe cumulus-ovocyte.
• En tant que membre de la famille des hyaluronidases, elle est classée comme une glycosidase (hydrolase) spécialisée dans la dégradation de l'acide hyaluronique.
• La protéine se localise sur la membrane des spermatozoïdes et présente une expression spécifique des testicules.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation liée à l'azote, la formation de ponts disulfure et un ancrage GPI qui la fixe à la membrane.
• L'épissage alternatif produit plusieurs isoformes, ce qui peut élargir son répertoire fonctionnel.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond à une séquence interne (aa 61–223) de la SPAM1 humaine ; par conséquent, l'anticorps devrait reconnaître la SPAM1 de pleine longueur ainsi que les isoformes comprenant cette région.
• Pour le Western blot, envisagez d'utiliser un lysat de testicule humain ou un extrait de protéines de spermatozoïdes comme contrôle positif, compte tenu de l'expression spécifique des tissus ; le poids moléculaire prédit est d'environ 58 kDa, bien que la glycosylation puisse entraîner un décalage.
• En immunohistochimie sur des coupes incluses en paraffine (IHC-P), optimisez la récupération antigénique et validez la réactivité sur du tissu testiculaire humain.
• Pour les applications ELISA, utilisez une protéine SPAM1 recombinante ou des lysats cellulaires exprimant la cible pour le dépôt ou la détection.
• La réactivité croisée avec le rat suggère une conservation de l'épitope ; confirmez l'adéquation aux échantillons de rat par un alignement de séquences et une validation expérimentale.

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