Anticorps polyclonal de lapin anti-Sonic Hedgehog (Shh) pour WB, IF/ICC, ELISA - Q15465

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de Sonic Hedgehog (Shh)

• La protéine Sonic Hedgehog (Shh), codée par le gène SHH, est un précurseur de morphogène dont les alias comprennent HHG-1 et ShhNC. Elle appartient à la famille des molécules de signalisation du développement Hedgehog.
• Le précurseur de pleine longueur subit une autoprotéolyse et une activité de transfert de cholestérol dans le réticulum endoplasmique, se scindant en domaine de signalisation N-terminal (ShhN) et en fragment C-terminal (ShhC), le cholestérol étant fixé à ShhN. Références associées : PMID:29954986 PMID:29995851 PMID:30139912
• ShhN, doublement lipidée, agit comme un morphogène en se liant au récepteur Patched (PTCH1/PTCH2), levant ainsi l'inhibition de Smoothened (SMO), ce qui active la voie de signalisation SMO et la transcription des gènes cibles en aval. Références associées : PMID:10753901 PMID:24522195 PMID:24863049 PMID:29995851 PMID:31548691
• Shh est essentielle à de nombreux processus du développement, notamment la structuration du système nerveux central, la formation de l'axe antéro-postérieur des bourgeons des membres, la spécification du devenir ventral des cellules du tube neural et des somites, ainsi que le guidage axonal.
• Au niveau subcellulaire, Shh se localise à la membrane du réticulum endoplasmique et à la membrane de l'appareil de Golgi, et est sécrétée dans l'espace extracellulaire ; elle s'associe également à la membrane cellulaire par l'intermédiaire de ses modifications lipidiques.
• Les principaux mots-clés comprennent le clivage autocatalytique, la liaison au calcium, la protéine du développement, les variants associés à des maladies (holoprosencéphalie, microphtalmie), la glycoprotéine, la lipoprotéine et la liaison au zinc.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Compte tenu de la transformation du précurseur Shh en ShhN et ShhC, le Western blot peut révéler plusieurs bandes ; les anticorps produits contre la région C-terminale (aa 231-330) peuvent reconnaître à la fois le précurseur de pleine longueur (~50 kDa) et éventuellement les fragments transformés.
• En immunofluorescence/immunocytochimie, un signal peut être observé au niveau de la membrane plasmique, de l'appareil de Golgi ou du réticulum endoplasmique, reflétant le trafic et la sécrétion de la protéine. Une co-coloration avec des marqueurs d'organites est recommandée pour une localisation précise.
• Cet anticorps polyclonal, produit chez le lapin à l'aide d'un peptide synthétique comme immunogène, peut présenter une variabilité d'un lot à l'autre ; inclure des contrôles positifs et négatifs appropriés dans chaque expérience.
• Bien que validée pour les échantillons humains, la réactivité croisée avec d'autres espèces n'a pas été testée ; vérifier la réactivité dans le système modèle concerné en cas d'utilisation d'échantillons non humains.

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