Anticorps polyclonal de lapin anti-SMPD3 pour WB et ELISA - Q9NY59

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la SMPD3

• La SMPD3 code pour la sphingomyélinase neutre 2 (nSMase2), qui hydrolyse la sphingomyéline pour générer le lipide bioactif céramide et la phosphocholine.
• Le céramide produit par la SMPD3 médie l'apoptose cellulaire et l'arrêt de la croissance, et l'enzyme peut réguler indépendamment ces deux processus.
• La SMPD3 fonctionne comme un suppresseur de croissance dans les cellules confluentes, régulant ainsi le cycle cellulaire.
• La SMPD3 joue un rôle essentiel dans le développement postnatal, contribuant à la minéralisation des os et de la dentine. Références associées : PMID:10823942 PMID:14741383 PMID:15051724
• La SMPD3 hydrolyse également la sphingosylphosphocholine et se lie aux phospholipides anioniques tels que la phosphatidylsérine et l'acide phosphatidique, qui modulent son activité et sa localisation subcellulaire.
• Au niveau subcellulaire, la SMPD3 se localise sur la membrane de l'appareil de Golgi et sur la membrane cellulaire.
• La SMPD3 subit un épissage alternatif pour produire de multiples variants de transcrits.
• Principalement exprimée dans le cerveau, la SMPD3 pourrait être impliquée dans l'activation de JNK induite par l'IL-1β dans les hépatocytes et dans la régulation de NOS2/iNOS médiée par NF-κB dans des conditions inflammatoires (par similarité).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre la région C-terminale (aa 416-655) qui peut conférer une spécificité d'isoforme ; validez la spécificité de l'anticorps en utilisant un blocage peptidique ou des contrôles d'invalidation (knockdown) pour votre système cible.
• Pour le Western blot, la bande attendue se situe à environ 71 kDa. Optimisez les conditions de charge protéique et de blocage, et utilisez des lysats de tissus cérébraux (humains, de souris ou de rat) comme contrôles positifs compte tenu de la forte expression cérébrale.
• Dans les applications ELISA, effectuez des dilutions en série de l'anticorps pour déterminer la concentration de travail optimale ; incluez la protéine SMPD3 recombinante comme contrôle positif.
• La palmitoylation de la SMPD3 (telle qu'indiquée par UniProt) peut influencer la migration ou la liaison de l'anticorps ; les conditions de dénaturation et de réduction doivent être maintenues pendant la préparation de l'échantillon.
• Une réactivité croisée avec la souris et le rat est rapportée ; cependant, vérifiez les modèles de coloration par rapport à des modèles knockout ou de surexpression pour garantir la spécificité.

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