Anticorps monoclonal de lapin anti-SMPD1 (Validé KO) pour WB, IF-F, IHC-P, ELISA - P17405

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la SMPD1

• Le gène SMPD1 code pour la sphingomyéline phosphodiestérase, également connue sous le nom de sphingomyélinase acide (aSMase). L'épissage alternatif produit des isoformes ; la protéine existe sous deux formes enzymatiques issues d'un trafic alternatif : une endolysosomale, l'autre sécrétée. Références associées : PMID:20807762 PMID:21098024 PMID:9660788
• Dans les lysosomes, l'aSMase convertit la sphingomyéline en céramide, jouant un rôle critique dans l'export du cholestérol depuis les membranes intra-endolysosomales et présentant des activités de phospholipase C. Références associées : PMID:20807762 PMID:21098024 PMID:25339683
• Module l'apoptose induite par le stress via la production de céramide. Références associées : PMID:8706124
• L'aSMase sécrétée réorganise la membrane plasmique en convertissant la sphingomyéline en céramide, et sa sécrétion est régulée à la hausse par les médiateurs inflammatoires et les pathogènes, facilitant la défense de l'hôte et l'internalisation des agents pathogènes. Références associées : PMID:12563314 PMID:17303575 PMID:20807762 PMID:9393854
• Lors d'une infection bactérienne, la forme lysosomale est libérée dans l'espace extracellulaire et clivée par la CASP7, favorisant la réparation de la membrane plasmique et contrecarrant les pores de perforine de la GSDMD. Références associées : PMID:21157428
• La localisation subcellulaire comprend les lysosomes, les gouttelettes lipidiques et la sécrétion dans l'espace extracellulaire.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation, la phosphorylation et la formation de ponts disulfure ; l'enzyme est dépendante du zinc (liaison aux métaux).

Guide expérimental et conseils techniques

• L'anticorps est produit contre un fragment recombinant couvrant les acides aminés 70–340 de la SMPD1 humaine, qui peut reconnaître des épitopes au sein du domaine catalytique. Envisagez de valider la spécificité en utilisant des lysats de cellules knockout (KO) lorsque cela est possible.
• Pour le Western blot (WB), utilisez des conditions réductrices et attendez-vous à un bande d'environ 70 kDa. L'enrichissement lysosomal ou un traitement avec des agents de stress peut améliorer la détection.
• En immunofluorescence (IF-F) et en immunohistochimie (IHC-P), la perméabilisation et la récupération antigénique sont recommandées. Une co-marquage avec des marqueurs lysosomaux peut confirmer la localisation subcellulaire.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé dans le cadre d'une paire appariée ; effectuez un titrage et optimisez les conditions pour votre format de dosage spécifique.
• La réactivité croisée est rapportée pour l'humain et le rat ; pour les autres espèces, une validation est conseillée.

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