Anticorps polyclonal anti-SMPD1 / ASM pour WB, IF/ICC, ELISA - P17405

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la SMPD1 / ASM

• La SMPD1/ASM est une hydrolase lysosomale qui convertit la sphingomyéline en céramide, un médiateur lipidique impliqué dans l'apoptose, la différenciation et la signalisation cellulaire. Références associées : PMID:12563314, PMID:1840600, PMID:18815062
• Elle existe sous deux formes enzymatiques : l'une ciblée vers le compartiment endolysosomal et l'autre libérée dans l'espace extracellulaire, l'exocytose lysosomale étant une source majeure de la forme sécrétoire. Références associées : PMID:20807762, PMID:21098024, PMID:9660788, PMID:12563314, PMID:20530211
• Dans les lysosomes, elle convertit la sphingomyéline en céramide et joue un rôle dans l'export du cholestérol à partir des membranes intraendolysosomales ; elle possède également une activité phospholipase C. Références associées : PMID:20807762, PMID:21098024, PMID:25339683
• L'ASM sécrétée réorganise les rafts de la membrane plasmique en générant du céramide, ce qui est crucial pour la défense de l'hôte contre des pathogènes comme Pseudomonas aeruginosa. Références associées : PMID:12563314, PMID:17303575, PMID:20807762, PMID:9393854
• Le clivage par la CASP7 dans l'espace extracellulaire produit une forme plus active qui augmente la production de céramide et la réparation de la membrane plasmique lors d'une infection bactérienne. Références associées : PMID:21157428
• L'activation de l'ASM est détournée par des virus tels que le SRAS-CoV et le SRAS-CoV-2 pour faciliter l'infection, ainsi que par des bactéries comme N. gonorrhoeae.
• Les défauts génétiques dans le gène SMPD1 conduisent à la maladie de Niemann-Pick, un trouble de stockage lysosomal caractérisé par l'accumulation de sphingomyéline.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène couvre une large région centrale (aa 70-340) de la SMPD1 humaine, ce qui suggère que l'anticorps peut reconnaître à la fois les formes précurseur et mature. Pensez à utiliser des inhibiteurs de protéases pendant la préparation des échantillons pour préserver l'intégrité de la protéine pleine longueur.
• Pour le Western blot, une bande d'environ 70 kDa est attendue. Vérifiez la spécificité en utilisant des contrôles positifs appropriés (par exemple, des lysats cellulaires humains, murins ou de rat connus pour exprimer la SMPD1) et incluez des contrôles négatifs.
• En immunofluorescence/ICC, une coloration peut être observée dans les compartiments lysosomaux ; une double coloration avec des marqueurs lysosomaux est recommandée pour confirmer la localisation.
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec la souris et le rat ; il peut donc être utilisé dans des études sur modèles rongeurs, mais validez toujours dans l'espèce et le contexte tissulaire pertinents.
• Les protocoles ELISA doivent être optimisés avec la protéine SMPD1 recombinante ou des antigènes de revêtement appropriés ; envisagez de l'associer à des anticorps de détection appariés pour un ELISA sandwich.

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