Anticorps Monoclonaux de Lapin Anti-SMG1 pour WB et ELISA - Q96Q15

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du SMG1

• SMG1 est une sérine/thréonine protéine kinase qui joue un rôle central dans la dégradation de l'ARNm médiée par les codons non-sens (NMD) en phosphorylant UPF1/RENT1. Il fait partie du complexe SMG1C avec SMG8 et SMG9.
• Il est recruté sur les ribosomes bloqués pour former le complexe SURF (SMG1-UPF1-eRF1-eRF3), qui s'associe au complexe de jonction d'exon (EJC) via UPF2 pour déclencher le NMD.
• Outre le NMD, SMG1 fonctionne également dans la réponse au stress génotoxique, phosphorylant p53/TP53 et contribuant à une activation optimale de p53 après des dommages à l'ADN. Sa déplétion entraîne des dommages spontanés à l'ADN et une sensibilité accrue aux rayonnements ionisants.
• SMG1 se localise à la fois dans le noyau et le cytoplasme.
• Il est largement exprimé, avec les niveaux les plus élevés dans le cœur et le muscle squelettique, et est également présent dans le placenta, le cerveau, le poumon et la rate, mais absent dans le foie.
• La protéine contient un domaine de liaison à l'ATP et nécessite du manganèse comme cofacteur métallique. Elle subit une acétylation et une phosphorylation.
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes de SMG1.

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• L'immunogène correspond à une séquence située dans la région C-terminale (aa 3562–3661) du SMG1 humain, distincte du domaine kinase, permettant potentiellement la détection des isoformes complètes et tronquées en Western blot.
• Pour le Western blot, en raison de la grande taille de la protéine (~411 kDa), utilisez un gel SDS-PAGE à faible pourcentage (ex : 6 % ou en gradient) et des temps de transfert prolongés pour assurer un transfert efficace de la protéine de haut poids moléculaire.
• Validez la performance de l'anticorps sur des échantillons de souris si une réactivité croisée est requise, car il est rapporté que l'anticorps réagit de manière croisée avec le SMG1 de souris.
• Pour l'ELISA, envisagez d'utiliser le même peptide comme antigène de contrôle positif pour établir les conditions de l'essai.
• Dans les études sur le NMD ou les dommages à l'ADN, utilisez des contrôles appropriés (ex : statut de phosphorylation d'UPF1) pour confirmer l'activité de SMG1 dans votre système expérimental.

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