Anticorps monoclonal anti-SMC4 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q9NTJ3

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de SMC4

• SMC4 (protéine de maintien structurel des chromosomes 4) est un composant central du complexe condensine, également connu sous le nom de polypeptide C associé aux chromosomes (hCAP-C) ou homologue de XCAP-C, avec les alias CAPC, SMC-4, SMC4L1.
• Il joue un rôle crucial dans la conversion de la chromatine interphasique en chromosomes condensés de type mitotique, introduisant des supertours positifs dans l'ADN relaxé en présence de topoisomérases de type I et convertissant l'ADN coupé en formes nouées positives avec les topoisomérases de type II.
• SMC4 appartient à la famille SMC (Maintien Structurel des Chromosomes), qui comprend des protéines centrales impliquées dans l'organisation, la cohésion et la condensation des chromosomes.
• La protéine se localise dans le noyau, le cytoplasme et les chromosomes, ce qui correspond à son rôle dynamique au cours du cycle cellulaire.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l'acétylation et la phosphorylation, comme indiqué par les mots-clés UniProt, suggérant des mécanismes de régulation dans la division cellulaire.
• Exprimée largement avec des niveaux plus élevés dans les testicules, le côlon et le thymus, reflétant son rôle essentiel dans les tissus proliférants.
• Les mots-clés mettent également en évidence les domaines de liaison à l'ATP et aux nucléotides, soutenant ses fonctions condensiniques dépendantes de l'énergie.

Guide expérimental et conseils techniques

• Conception de l'immunogène : L'anticorps a été généré contre un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 1189-1288 de SMC4 humain (Q9NTJ3). En raison de la conservation de la séquence, une réactivité croisée avec SMC4 de souris et de rat est attendue, mais nous recommandons de la vérifier dans des lysats de tissus ou de cellules pertinents.
• Western blot (WB) : Le poids moléculaire prédit est d'environ 147 kDa. Utilisez un pourcentage de gel approprié (par exemple, SDS-PAGE 6-8 %) et des conditions de transfert adaptées aux protéines de haut poids moléculaire.
• Immunofluorescence/Immunocytochimie (IF/ICC) : SMC4 se localise dans le noyau et les chromosomes ; les protocoles standard de fixation et de perméabilisation devraient être efficaces. Validez la spécificité de l'anticorps en utilisant des contrôles positifs tels que des cellules en prolifération (par exemple, HeLa) où l'activité condensine est élevée.
• ELISA : Convient pour la détection de SMC4 dans des formats ELISA sandwich ou indirect ; l'optimisation de l'antigène de revêtement et de la concentration en anticorps est conseillée.

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