Anticorps monoclonal anti-SMARCB1/SNF5 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q12824

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de SMARCB1/SNF5

• SMARCB1/SNF5 (également appelé BAF47, INI1, hSNF5) est une sous-unité centrale du complexe de remodelage de la chromatine BAF (SWI/SNF) dépendant de l'ATP, qui module la structure des nucléosomes et l'accessibilité de l'ADN.
• Le complexe BAF convertit jusqu'à la moitié des nucléosomes en altosomes asymétriques, chacun contenant deux octamères d'histones, modifiant ainsi le surenroulement de l'ADN et facilitant la régulation transcriptionnelle.
• SMARCB1 stimule directement l'activité de remodelage de l'ATPase SMARCA4/BRG1 et est nécessaire à l'activation du promoteur CSF1, ce qui l'associe à la différenciation des macrophages et des ostéoclastes.
• C'est un composant intégral des complexes de remodelage de la chromatine npBAF (progéniteur neural) et nBAF (spécifique des neurones), avec un changement de sous-unités au cours de la différenciation neuronale essentiel à la morphogenèse correcte des dendrites et à l'identité neuronale post-mitotique.
• SMARCB1 fonctionne comme un suppresseur de tumeur, comme l'atteste son rôle dans le contrôle du cycle cellulaire : il provoque un arrêt en phase G0/G1 et est fréquemment inactivé dans les tumeurs rhabdoïdes malignes et d'autres cancers.
• La protéine est localisée exclusivement dans le noyau, ce qui est cohérent avec son rôle dans la régulation de la chromatine et la transcription.
• Les modifications post-traductionnelles clés comprennent la phosphorylation (phosphoprotéine) et l'ubiquitination (conjugaison Ubl), qui peuvent réguler sa stabilité et ses interactions.
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes, augmentant la diversité fonctionnelle ; il participe également aux interactions hôte-virus (par exemple, la liaison à l'intégrase du VIH-1).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à une région centrale (acides aminés 275-375) de la SMARCB1 humaine, qui est bien conservée chez l'homme, la souris et le rat (conformément à la réactivité croisée indiquée). Cette région ne se situe pas dans des domaines fonctionnels connus, ce qui réduit potentiellement les interférences avec les interactions protéiques.
• Pour le Western blot (WB), le poids moléculaire prédit est d'environ 44 kDa. Envisagez d'utiliser des lysats de cellules entières de lignées cellulaires humaines, de souris ou de rat ; incluez des contrôles appropriés (par exemple, des lysats de knock-out de SMARCB1 si disponibles) pour confirmer la spécificité de la bande.
• Pour l'immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), attendez une coloration nucléaire. Les conditions de perméabilisation et de fixation doivent être optimisées ; une co-coloration avec des marqueurs nucléaires (par exemple, DAPI) est recommandée.
• Pour les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé dans des formats directs ou sandwich ; validez la sensibilité et la spécificité avec la protéine SMARCB1 recombinante ou des lysats cellulaires.
• Compte tenu du rôle essentiel de SMARCB1 dans le remodelage de la chromatine et la suppression tumorale, cet anticorps est adapté à l'étude de la biologie de la chromatine, du neurodéveloppement et des mécanismes cancéreux. Effectuez une validation dans votre système d'échantillon et votre application concernés.

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