Anticorps monoclonal anti-SMARCAD1 pour WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q9H4L7

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de SMARCAD1

• SMARCAD1 (régulateur de chromatine associé à la matrice dépendant de l'actine apparenté à SWI/SNF, sous-famille A contenant la boîte DEAD/H 1) possède une activité intrinsèque de remodelage des nucléosomes dépendante de l'ATP et est nécessaire à la fois pour la réparation de l'ADN et l'organisation de l'hétérochromatine. Références associées : PMID:22960744 PMID:21820097
• Il combine un échange d'histones dépendant de l'ATP avec un dépôt d'histones indépendant de l'ATP de type chaperon et l'assemblage des nucléosomes. Références associées : PMID:21820097
• Favorise la résection des extrémités de l'ADN au niveau des cassures double brin (CDB) en affaiblissant les interactions histone-ADN dans les nucléosomes adjacents. Références associées : PMID:22960744
• Nécessaire à la restauration de l'organisation de l'hétérochromatine après la réplication ; facilite le maintien en dirigeant la désacétylation de H3 et H4, la triméthylation de H3K9 (H3K9me3) et la restauration du silence transcriptionnel. Références associées : PMID:21549307
• Se localise principalement dans le noyau et sur les chromosomes.
• L'isoforme 1 est largement exprimée ; l'isoforme 3 se trouve principalement dans la peau et l'œsophage. Les deux isoformes sont détectées au niveau protéique dans les fibroblastes et les kératinocytes. Références associées : PMID:29409814
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l'acétylation, la phosphorylation et l'ubiquitination ; la protéine canonique a un poids moléculaire d'environ 117 kDa.

Guide expérimental et conseils techniques

• Sur la base de la séquence de l'immunogène (acides aminés 928–1026), cet anticorps reconnaît la région C-terminale de SMARCAD1. Pour le Western blot (WB), préparez les lysats en utilisant un tampon RIPA standard et recherchez des bandes proches de 117 kDa et une isoforme plus petite à ~68 kDa ; incluez des contrôles positifs tels que des extraits de fibroblastes ou de kératinocytes.
• Pour l'immunoprécipitation (IP), utilisez 1–2 µg d'anticorps pour 500 µg de lysat cellulaire et validez la co-précipitation avec des partenaires d'interaction connus ou des contrôles IgG négatifs.
• En immunofluorescence (IF/ICC) et en immunohistochimie (IHC-P), fixez les cellules ou les coupes tissulaires avec du paraformaldéhyde à 4 % et perméabilisez avec du Triton X-100 à 0,1 % ; des profils de marquage nucléaire sont attendus. Optimisez la récupération antigénique pour les coupes en paraffine.
• Pour les applications ELISA, enrobez les plaques avec un fragment recombinant de SMARCAD1 ou des lysats de cellules/tissus et effectuez un titrage en damier pour déterminer les concentrations optimales d'anticorps et d'antigène.
• Étant donné la réactivité croisée avec l'humain, la souris et le rat, l'anticorps convient aux études multi-espèces ; cependant, vérifiez ses performances dans votre système expérimental spécifique.

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