Anticorps polyclonal de lapin anti-Smad5 pour WB, IHC-P, ELISA - Q99717

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Smad5

• SMAD5 est un membre de la famille SMAD, également connu sous les noms JV5-1, Mothers against decapentaplegic homolog 5 (homologue MAD 5), codé par le gène SMAD5 (MADH5).
• Suite à la stimulation par un ligand BMP, SMAD5 est phosphorylé par les récepteurs BMP de type I activés (BMPRI) et forme un complexe avec SMAD4. Ce complexe se translocate vers le noyau et régule la transcription génique en se liant aux éléments de liaison Smad (SBE) (PubMed:9442019, PubMed:33510867). Références associées : PMID:9442019 PMID:33510867
• SMAD5 intervient dans de nombreux processus biologiques, notamment le développement embryonnaire, la différenciation cellulaire, l'angiogenèse et l'homéostasie tissulaire (PubMed:12064918, PubMed:16516194). Références associées : PMID:12064918 PMID:16516194
• Dans son état non phosphorylé, SMAD5 se localise dans le cytoplasme et les mitochondries, où il favorise la respiration mitochondriale et la glycolyse en interagissant avec l'hexokinase 1 (HK1) en réponse aux variations du pH cytoplasmique (PubMed:28675158). Références associées : PMID:28675158
• La localisation sous-cellulaire comprend le cytoplasme, le noyau et la mitochondrie, ce qui reflète son double rôle dans la transduction du signal et le métabolisme énergétique.
• Il est exprimé de manière ubiquitaire dans divers tissus.
• Il est modifié post-traductionnellement par phosphorylation et acétylation, et contient des domaines de liaison au zinc et à l'ADN essentiels à sa fonction de régulateur transcriptionnel.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blotting, attendez une bande autour de 52 kDa ; utilisez des témoins de chargement appropriés et validez avec des lysats cellulaires positifs et négatifs connus.
• En immunohistochimie (IHC-P), la récupération d'antigène peut être nécessaire en raison de la localisation nucléaire/cytoplasmique ; testez sur des coupes de tissus dont l'expression de SMAD5 est confirmée.
• L'immunogène couvre la région C-terminale (acides aminés 186-465) incluant le domaine MH2, donc l'anticorps peut reconnaître à la fois les formes phosphorylées et non phosphorylées ; confirmez l'état d'activation à l'aide d'anticorps phospho-spécifiques ou de traitements appropriés.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat indique que les épitopes sont conservés ; lorsque vous l'appliquez à d'autres espèces, vérifiez l'homologie de séquence et effectuez une validation.
• Pour l'ELISA, optimisez les conditions de revêtement et utilisez du SMAD5 recombinant ou des lysats cellulaires comme témoins positifs.

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