Anticorps Monoclonal Lapin Anti-Smad4 [Validé KO] pour WB, IHC-P, IP, ELISA, ChIP, CUT&Tag - Q13485

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de SMAD4

• Le membre 4 de la famille SMAD (SMAD4), également connu sous le nom de DPC4, MADH4 et co-SMAD, est un médiateur central des voies de transduction du signal TGF-beta et BMP.
• Le SMAD commun (co-SMAD) agit comme un coactivateur et médiateur de la signalisation TGF-beta. Il forme un complexe hétérotrimérique avec SMAD2/SMAD3 dans le noyau, ce qui est nécessaire pour la régulation transcriptionnelle médiée par TGF-beta. Références connexes : PMID:25514493
• Dans la physiologie musculaire, SMAD4 équilibre l'atrophie et l'hypertrophie : recruté par MSTN, il favorise l'atrophie via SMAD2/4 phosphorylé ; lors de la diminution de MSTN, SMAD4 bascule vers la voie BMP pour favoriser l'hypertrophie via SMAD1/5/8.
• Agit en synergie avec SMAD1 et YY1 dans l'expression génique cardiaque spécifique médiée par BMP, se liant aux éléments de liaison SMAD (SBE) dans les éléments de réponse BMP (BMPRE) des régions d'activation cardiaque.
• Composant du complexe SMAD3/SMAD4/JUN/FOS au niveau du site du promoteur AP1, nécessaire pour l'activité transcriptionnelle synergique de TGF-beta.
• Peut agir comme un suppresseur de tumeur ; initialement identifié comme cible de délétion dans le carcinome pancréatique 4 (DPC4), l'impliquant dans la biologie du cancer.
• La localisation subcellulaire est principalement cytoplasmique mais transloque vers le noyau lors de l'activation du récepteur, cohérent avec son rôle dans la transduction du signal.

Guides Expérimentaux et Conseils Techniques

• Pour le Western blot (WB), une bande d'environ 60 kDa est attendue ; envisagez d'utiliser des conditions réductrices et de valider avec des lysats de témoins positifs appropriés (par ex. HeLa, HEK293) et des témoins knockout (KO).
• En immunohistochimie (IHC-P), la récupération de l'antigène et la titration de l'anticorps sont recommandées ; incluez des témoins d'isotype et vérifiez la coloration sur les sections tissulaires pertinentes.
• Pour l'immunoprécipitation (IP), les protocoles standard avec billes Protein A/G sont adaptés ; confirmez la co-immunoprécipitation des partenaires d'interaction SMAD (par ex. SMAD2/3).
• Lors de la réalisation de ChIP ou CUT&Tag, l'épitope (aa320-552) réside dans la région C-terminale ; assurez l'accessibilité de la chromatine et optimisez la concentration d'anticorps pour chaque essai.
• La détection basée sur ELISA peut être développée en utilisant cet anticorps comme anticorps de capture ou de détection, mais des titrations en damier empiriques sont nécessaires pour déterminer les concentrations de travail optimales.

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