Anticorps polyclonal de lapin anti-Smad3 pour WB, IF/ICC, ELISA - P84022

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Smad3

• Le membre 3 de la famille SMAD (Smad3), également connu sous le nom de MAD homologue 3 ou hMAD-3, est un transducteur de signal intracellulaire et un modulateur transcriptionnel codé par le gène SMAD3 (MADH3).
• En tant que SMAD régulé par les récepteurs (R-SMAD), Smad3 médie la signalisation TGF-bêta et de l'activine en se liant aux kinases de récepteur de type 1.
• Lors de sa phosphorylation, Smad3 forme un complexe avec SMAD4, transloque vers le noyau et se lie à l'élément TRE dans les régions promotrices pour réguler la transcription des gènes cibles.
• Il peut également interagir avec les facteurs de transcription AP-1 JUN/FOS pour former un complexe sur les sites AP-1/SMAD, modulant ainsi la transcription.
• Smad3 effectue un navage entre le cytoplasme et le noyau, sa localisation subcellulaire étant dynamiquement influencée par l'activité de signalisation.
• La protéine subit de multiples modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, l'acétylation, l'ADP-ribosylation et l'ubiquitination, et contient un domaine de liaison au zinc.
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes, et Smad3 est impliqué dans des processus tels que la cicatrisation, la chondrogenèse, l'ostéogenèse et l'anévrisme aortique.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 150 à 250 du Smad3 humain, une région censée être exposée et conservée chez l'homme, la souris et le rat, ce qui soutient la réactivité croisée.
• Pour le Western blot, attendez-vous à une bande autour de 48 kDa ; validez la détection dans des lysats cellulaires pertinents et envisagez des contrôles appropriés pour confirmer la spécificité.
• En immunofluorescence/ICC, optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation, et utilisez une coloration nucléaire de contre-marquage pour surveiller la translocation de Smad3 lors de la stimulation par le TGF-bêta.
• Pour l'ELISA, associez à un anticorps de détection apparié et testez des dilutions en série de Smad3 recombinant ou d'échantillons natifs pour établir la plage linéaire et la sensibilité.

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