Anticorps monoclonal anti-Smad3 de lapin (validé KO) pour WB, IHC-P, ELISA - P84022

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Smad3

• SMAD family member 3 (Smad3) est un transducteur de signal intracellulaire et un modulateur transcriptionnel activé par les kinases du récepteur de type 1 du TGF-bêta (transforming growth factor) et de l'activine.
• Il se lie à l'élément TRE dans la région promotrice de nombreux gènes régulés par le TGF-bêta et, après formation du complexe SMAD3/SMAD4, active la transcription. Il peut également s'assembler en complexe SMAD3/SMAD4/JUN/FOS sur le site AP-1/SMAD pour réguler la transcription médiée par le TGF-bêta.
• Smad3 régule négativement la cicatrisation, probablement en modulant à la fois la croissance et la migration des kératinocytes primaires et en altérant la chimiotaxie des monocytes médiée par le TGF-bêta. Cet effet semble être sensible aux hormones.
• Il agit comme régulateur de la chondrogenèse et de l'ostéogenèse et inhibe la cicatrisation précoce des fractures osseuses.
• Smad3 régule positivement l'activité kinase de PDPK1 en stimulant sa dissociation de la protéine 14-3-3 YWHAQ, qui agit comme régulateur négatif.
• La protéine se localise à la fois dans le cytoplasme et le noyau.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation, l'ADP-ribosylation, la phosphorylation et l'ubiquitination. Elle contient des domaines de liaison aux métaux et à l'ADN et participe aux interactions hôte-virus.
• L'épissage alternatif génère de multiples isoformes.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène utilisé est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 100–200 de Smad3 humain (NP_005893.1). Lors de l'utilisation sur des espèces non humaines, confirmez l'homologie de séquence pour garantir la réactivité.
• Pour le Western blot (WB), utilisez des contrôles de charge appropriés et vérifiez la bande à environ 48 kDa ; la validation par knock-out est recommandée pour confirmer la spécificité dans vos échantillons.
• Pour l'IHC-P, optimisez les conditions de récupération antigénique et incluez des contrôles tissulaires positifs et négatifs pour valider les profils de coloration.
• Pour les applications ELISA, envisagez le couplage avec un anticorps de capture ou de détection adapté pour les formats sandwich, et confirmez les performances avec la protéine Smad3 recombinante.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat a été validée ; cependant, une vérification indépendante dans votre système expérimental spécifique est recommandée.

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