Anticorps monoclonal anti-Smad3 (validé par KO) pour WB, IP, IHC-P, ELISA - P84022

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de Smad3

• SMAD3 (homologue 3 de Mothers against decapentaplegic, également connu sous les noms MADH3, hMAD-3 et JV15-2) est un transducteur de signaux intracellulaires et un modulateur transcriptionnel appartenant à la famille SMAD.
• Il fonctionne comme un SMAD régulé par un récepteur (R-SMAD), activé par les kinases des récepteurs de type 1 du TGF-bêta et de l’activine, et se lie à l’élément TRE des promoteurs des gènes cibles.
• Après phosphorylation, SMAD3 forme un complexe avec SMAD4 et se transpose dans le noyau pour réguler la transcription des gènes sensibles au TGF-bêta ; il peut également interagir avec JUN/FOS au niveau des sites AP-1/SMAD.
• SMAD3 exerce un effet inhibiteur sur la cicatrisation des plaies en modulant la croissance, la migration des kératinocytes et la chimiotaxie des monocytes de manière dépendante des hormones.
• Il agit comme un régulateur clé de la chondrogenèse et de l’ostéogenèse, en inhibant la phase précoce de la guérison des fractures osseuses.
• SMAD3 régule positivement l’activité de la kinase PDPK1 en stimulant sa dissociation de la protéine inhibitrice 14-3-3 YWHAQ.
• La localisation subcellulaire est dynamique : principalement cytoplasmique dans les conditions basales, mais il s’accumule dans le noyau lors de l’activation de la voie de signalisation.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation, l’acétylation, l’ADP-ribosylation et l’ubiquitination, la liaison au zinc étant essentielle à sa fonction ; il est impliqué dans les anévrismes aortiques et les interactions virales.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène utilisé est une protéine de fusion recombinante couvrant les acides aminés 119-219 du Smad3 humain, ce qui peut conférer une grande spécificité ; il est recommandé de vérifier les performances dans votre contexte expérimental spécifique.
• Cet anticorps est validé par KO, ce qui le rend adapté à l’application Western blot (WB) pour évaluer la spécificité à l’aide de lignées cellulaires knockout.
• Pour l’immunoprécipitation (IP) et l’immunohistochimie (IHC-P), confirmez la compatibilité avec vos protocoles de préparation des échantillons et de détection.
• L’ELISA peut être utilisé pour une analyse quantitative ; incluez les contrôles appropriés et validez les résultats par rapport à des étalons connus.

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