Anticorps polyclonal de lapin anti-SMAD2/SMAD3 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q15796/P84022

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de SMAD2/SMAD3

• SMAD2 est une protéine SMAD régulée par un récepteur (R-SMAD), également connue sous les noms MADH2, MADR2 et JV18-1, et partage une forte homologie avec SMAD3.
• Elle agit comme transducteur intracellulaire des signaux des kinases des récepteurs de type 1 du TGF-bêta et de l’activine, en assurant la médiation des réponses transcriptionnelles.
• Après phosphorylation, SMAD2 forme un complexe avec SMAD4, migre vers le noyau et se lie à l’élément TRE afin de réguler la transcription des gènes cibles.
• SMAD2 régule positivement l’activité de la kinase PDPK1 en stimulant sa dissociation de la protéine 14-3-3 YWHAQ.
• Pourrait agir comme suppresseur de tumeur dans le carcinome colorectal. Références associées : PMID:8752209
• La localisation subcellulaire est cytoplasmique et nucléaire, avec une navette en réponse à l’activation de la signalisation.
• Fortement exprimée dans les muscles squelettiques, les cellules endothéliales, le cœur et le placenta.
• Soumise à des modifications post-traductionnelles, notamment l’acétylation, la phosphorylation et la conjugaison à l’ubiquitine, qui régulent son activité et sa stabilité.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 150 à 270 de SMAD2/SMAD3 humain (NP_005893.1) ; il est recommandé d’effectuer un alignement des séquences afin d’évaluer la réactivité croisée avec d’autres espèces ou isoformes.
• Pour le Western blot, prévoir des bandes autour de 52 kDa (SMAD2) et 48 kDa (SMAD3) ; des bandes supplémentaires peuvent correspondre à des formes issues d’un épissage alternatif ou à des protéines modifiées post-traductionnellement.
• Valider la spécificité de l’anticorps à l’aide d’une extinction par siRNA, de lignées cellulaires knock-out ou d’un traitement à la phosphatase afin de confirmer les signaux dépendants de la phosphorylation.
• Pour l’immunohistochimie (IHC-P) et l’immunofluorescence (IF/ICC), une récupération antigénique optimale et un titrage de l’anticorps sont recommandés pour obtenir les meilleurs rapports signal/bruit.
• L’ELISA peut être utilisé pour une détection quantitative ; veiller à optimiser les tampons de revêtement et les conditions d’incubation appropriés au système d’échantillon concerné.

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