Anticorps monoclonal de lapin anti-Slit2 pour WB, IHC-P, ELISA - O94813

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de Slit2

• Slit2 est une glycoprotéine sécrétée qui agit comme un signal moléculaire de guidage lors de la migration cellulaire, en interagissant avec les récepteurs roundabout (Robo) pour transmettre des signaux répulsifs.
• Au cours du développement neural, Slit2, avec Slit1, est essentielle pour empêcher le franchissement inapproprié des axones au niveau de la ligne médiane ventrale du prosencéphale et pour orienter les projections vers le bulbe olfactif.
• Dans la moelle épinière, Slit2 module les réponses des axones commissuraux à la nétrine et contribue à la répulsion après franchissement au niveau de la plaque du plancher.
• Dans le système visuel en développement, Slit2 agit comme un répulsif pour les axones des cellules ganglionnaires rétiniennes, provoquant l'effondrement des cônes de croissance et orientant correctement les axones à travers le chiasma optique.
• Le produit N-terminal protéolytique de Slit2 repousse spécifiquement les axones du bulbe olfactif et induit la ramification des axones des ganglions de la racine dorsale (DRG) in vitro, tandis que le produit C-terminal ne présente pas ces activités.
• Slit2 pourrait également être impliquée dans la régulation de la migration des leucocytes, ce qui indique des fonctions au-delà du système nerveux.
• Au niveau subcellulaire, Slit2 est localisée dans l'espace extracellulaire en tant que protéine sécrétée, ce qui est cohérent avec son rôle de signal de guidage.
• Les études d'expression tissulaire montrent une expression importante de Slit2 dans le poumon et le rein fœtaux ainsi que dans la moelle épinière adulte, avec une détection plus faible dans la glande surrénale, la thyroïde et la trachée.

Recommandations expérimentales et conseils techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 1400–1500 de Slit2 humain, situé dans la région C-terminale ; vérifiez la conservation de la séquence entre les espèces afin d'évaluer la réactivité croisée.
• Pour le Western blot, prévoyez une bande proche du poids moléculaire théorique de 170 kDa ; assurez un transfert adéquat des protéines et incluez des marqueurs de poids moléculaire appropriés.
• En immunohistochimie (IHC), envisagez d'effectuer une récupération antigénique et validez le profil de coloration à l'aide de contrôles négatifs appropriés, tels que des tissus ou des lignées cellulaires knock-out.
• Pour les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour la capture ou la détection ; optimisez les conditions avec la protéine Slit2 recombinante ou le peptide immunisant comme références standards.
• Étant donné que Slit2 est sécrétée, analysez le milieu conditionné ou utilisez des inhibiteurs de la sécrétion (par exemple, la bréfeldine A) afin de recueillir les pools de protéines intracellulaires lors des essais cellulaires.

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