Anticorps monoclonal anti-SLC25A4/ANT1 pour WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P12235

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de SLC25A4/ANT1

• Identité protéique et isoformes : SLC25A4 code pour l'isoforme cœur/muscle squelettique de la translocase ADP/ATP (ANT1), un membre de la famille des transporteurs mitochondriaux. Les noms alternatifs incluent Translocateur des nucléotides adényliques 1, Protéine transporteuse ADP/ATP 1 et Membre 4 de la famille des transporteurs de solutés 25.
• Fonction antiport principale : Catalyse l'échange de l'ATP mitochondrial contre l'ADP cytosolique, une étape critique dans l'apport énergétique cellulaire. Le transporteur fonctionne via un mécanisme d'accès alterné, alternant entre des états ouverts vers le cytoplasme et ouverts vers la matrice pour transporter un substrat à la fois. Références associées : PMID:21586654 PMID:27693233 PMID:23173940
• Implication dans le pore de transition de perméabilité mitochondriale (mPTP) : Participe au pore de transition de perméabilité mitochondriale, un canal non spécifique qui perméabilise la membrane mitochondriale interne et déclenche la mort cellulaire. Références associées : PMID:31883789
• Transporteur de protons et thermogenèse : En plus de l'échange de nucléotides, ANT1 peut fonctionner comme un transporteur de protons, découplant ainsi la respiration de la synthèse d'ATP pour générer de la chaleur. Cette activité de conduction protonique est régulée par les acides gras libres et est inhibée par l'échange ADP/ATP, positionnant ANT1 comme un régulateur majeur de l'équilibre de la production énergétique.
• Régulation de la mitophagie : Indépendamment de son activité de transport, ANT1 favorise la mitophagie en interagissant avec TIMM44, ce qui inhibe la translocase de préséquence mitochondriale TIM23 et stabilise PINK1 sur les mitochondries endommagées.
• Localisation subcellulaire : Réside exclusivement dans la membrane mitochondriale interne, une protéine transmembranaire à plusieurs passages.
• Modifications post-traductionnelles et mots-clés : La protéine est soumise à l'acétylation, la phosphorylation, la méthylation et la S‑nitrosylation. Les annotations UniProtKB mettent en lumière ses rôles dans la cardiomyopathie, l'ophtalmoplégie externe progressive et en tant que facteur hôte dans les interactions virales.
• Spécificité tissulaire : Exprimée dans les érythrocytes ainsi que dans les muscles cardiaque et squelettique (comme l'indique le nom de son isoforme).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique ciblant la région centrale (aa 100–200) du SLC25A4 humain. L'épitope se situe dans une région conservée ; la réactivité croisée avec la souris et le rat est étayée par l'alignement des séquences. Validez la réactivité avec votre espèce modèle spécifique si cela est critique.
• Pour le Western blot, une bande majeure à ~33 kDa est attendue. Des lysats témoins validés par KO (par exemple, HeLa ou A549) peuvent confirmer la spécificité et éviter les signaux non spécifiques.
• En immunohistochimie (IHC‑P) et immunofluorescence (IF/ICC), le profil de marquage doit être cytoplasmique avec une distribution mitochondriale. La récupération antigénique avec un tampon citrate (pH 6,0) peut améliorer la détection. Incluez des témoins isotypiques appropriés.
• L'anticorps est adapté à l'immunoprécipitation (IP) et à l'ELISA, le rendant polyvalent pour les études d'interaction et les dosages quantitatifs. Lors de l'utilisation de l'IP, envisagez de réticuler l'anticorps aux billes pour éviter la co-élution de la chaîne lourde à ~55 kDa.
• Pour les tests fonctionnels qui perturbent l'intégrité mitochondriale, notez que ANT1 peut influencer l'ouverture du mPTP ; ainsi, le marquage peut être affecté par l'état de stress cellulaire.

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