Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-SLC12A1 pour WB, ELISA - Q13621

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de SLC12A1

• SLC12A1 code le cotransporteur Na-K-2Cl spécifique du rein (NKCC2), un membre de la famille des transporteurs de solutés 12, qui médie le symport électroneutre des ions sodium, potassium et chlorure à travers la membrane apicale de la branche large ascendante (TAL) de l'anse de Henle. Références connexes : PMID:21321328
• NKCC2 est essentiel pour la réabsorption transépithéliale de NaCl dans la TAL, favorisant la concentration urinaire et la régulation du volume ; il constitue la cible principale des diurétiques de l'anse tels que le bumétanide.
• Le transporteur peut fonctionnellement substituer l'ammonium (NH4+) au potassium, facilitant la sécrétion apicale de NH4+ dans la TAL médullaire, un processus critique pour l'homéostasie rénale de l'ammonium lors de l'acidose métabolique.
• L'expression de SLC12A1 est hautement spécifique au rein, avec une localisation protéique restreinte à la membrane plasmatique apicale des cellules des branches larges ascendantes corticales et médullaires.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation N-liée et la phosphorylation, qui régulent le trafic et l'activité du transporteur en réponse à la vasopressine et à d'autres signaux hormonaux.
• Les mutations de SLC12A1 causent le syndrome de Bartter de type 1, un trouble rénal de perte de sel caractérisé par une alcalose hypokaliémique, une hypercalciurie et une polyurie, soulignant le rôle critique de NKCC2 dans l'équilibre électrolytique.

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant aux résidus 50–150 du SLC12A1 humain. Vérifiez la conservation de l'épitope si vous utilisez des échantillons non humains, bien qu'une réactivité croisée avec la souris et le rat ait été rapportée.
• Pour le Western blot de NKCC2 (PM prédit ~121 kDa), envisagez d'utiliser un gel de polyacrylamide à faible pourcentage (ex, : 6–8 %) et des temps de transfert prolongés pour assurer un transfert efficace de cette grande protéine membranaire glycosylée.
• Incluez des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse et envisagez un traitement à la phosphatase pour résoudre les décalages de bandes dépendants de la phosphorylation, car NKCC2 est régulé par phosphorylation en réponse aux hormones.
• Pour les applications ELISA, un format de dosage compétitif avec le peptide d'immunisation ou un format de capture utilisant un fragment de domaine extracellulaire recombinant pourrait convenir ; optimisez le tampon de revêtement et les conditions de blocage pour minimiser la liaison non spécifique.

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