Anticorps polyclonal de lapin anti-SIGLEC5 pour WB et ELISA - O15389

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de SIGLEC5

• SIGLEC5 (lectine 5 de type immunoglobuline liant l'acide sialique), également connue sous les noms CD170, CD33L2 et OB-BP2, est un membre de la superfamille des immunoglobulines et fonctionne comme une molécule d'adhésion dépendante de l'acide sialique (O15389).
• Elle se lie également aux résidus d'acide sialique liés en α-2,3 et en α-2,6, bien que son site de reconnaissance de l'acide sialique puisse être masqué par des interactions cis sur la surface de la même cellule.
• La protéine contient des domaines de type immunoglobuline, une région transmembranaire et une courte queue cytoplasmique, caractéristique de la famille des SIGLEC.
• Au niveau subcellulaire, SIGLEC5 est localisée sur la membrane cellulaire, ce qui est cohérent avec son rôle dans l'adhésion cellule-cellule.
• L'expression tissulaire est majoritairement observée dans les cellules de la lignée monocytaire/myéloïde, avec des niveaux élevés dans les leucocytes du sang périphérique, la rate et la moelle osseuse, et des niveaux plus faibles dans les ganglions lymphatiques, le poumon, l'appendice, le placenta, le pancréas et le thymus.
• Elle est exprimée sur les monocytes et les neutrophiles mais absente des lignées cellulaires leucémiques correspondant aux stades précoces de la différenciation myélomonocytaire, ce qui indique un rôle dans les cellules myéloïdes matures.
• La protéine contient un peptide signal, des liaisons disulfure, est glycosylée, et possède un domaine de type V immunoglobuline probablement impliqué dans la liaison à l'acide sialique.
• Son poids moléculaire est d'environ 61 kDa, et elle est classée comme une lectine ayant une fonction d'adhésion cellulaire.

Conseils expérimentaux et indications techniques

• Pour le Western blot, envisagez d'utiliser des lysats protéiques de leucocytes humains du sang périphérique ou de tissu splénique, où SIGLEC5 est fortement exprimée, comme témoin positif.
• Étant donné que l'immunogène couvre le domaine extracellulaire (aa 17-434), l'anticorps peut reconnaître à la fois les formes natives et dénaturées, mais l'optimisation des conditions de blocage et d'incubation est recommandée.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être testé sur la protéine SIGLEC5 recombinante ou des lysats cellulaires de lignées myéloïdes ; la réactivité croisée avec la SIGLEC5 de souris permet une utilisation potentielle dans des modèles murins.
• Puisque SIGLEC5 est glycosylée et possède des liaisons disulfure, une réduction douce avec du DTT ou du β-mercaptoéthanol peut être nécessaire pour maintenir la détection en WB ; envisagez d'analyser des échantillons réduits et non réduits.
• Validez toujours la spécificité de l'anticorps dans votre système expérimental en incluant un témoin négatif (par exemple, des lignées cellulaires knock-out ou des échantillons avec extinction par siRNA).

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