Anticorps Polyclonal Anti-SH3PXD2A pour WB, IF/ICC, ELISA - Q5TCZ1

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de SH3PXD2A

• SH3PXD2A (protéine adaptatrice contenant les domaines SH3 et PX 2A) est une protéine adaptatrice également connue sous le nom de TKS5, FISH et SH3MD1. Elle appartient à la famille TKS et contient un domaine PX N-terminal et cinq domaines SH3 C-terminaux, avec un épissage alternatif générant plusieurs isoformes.
• La protéine est une échafaudage clé dans la formation des invadopodes et podosomes, facilitant la dégradation de la matrice extracellulaire (ECM) et favorisant l'invasivité des cellules cancéreuses. Elle se lie aux métalloprotéinases matricielles (ADAM), aux oxydases NADPH (NOX) et aux phosphoinositides. Références connexes : PMID:27789576
• SH3PXD2A organise la production d'espèces réactives de l'oxygène (ROS) dépendantes de NOX1 ou NOX3 et localise les ROS aux invadopodes, contribuant à la signalisation cellulaire et au remodelage de la matrice.
• En association avec ADAM12, SH3PXD2A médie l'effet neurotoxique du peptide bêta-amyloïde, le liant aux processus neurodégénératifs.
• La protéine se localise dans le cytoplasme et se concentre aux projections cellulaires, en particulier aux podosomes, et est détectée dans les jonctions cellulaires.
• Elle est principalement exprimée dans les lignées cellulaires cancéreuses, avec des niveaux élevés trouvés dans les carcinomes du sein invasifs et les mélanomes.
• Une phosphorylation extensive régule la fonction de SH3PXD2A, et sa structure 3D a été caractérisée. La protéine présente des régions en hélice alpha (coiled-coil) et des répétitions de domaine SH3.

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• L'immunogène englobe les acides aminés 806–1105, couvrant la région C-terminale riche en domaines SH3. Cette conception cible une zone fonctionnellement critique, mais vous devez envisager la variabilité potentielle des isoformes et valider la reconnaissance dans votre système expérimental spécifique.
• Pour le Western blotting, attendez-vous à une bande autour de 125 kDa ; cependant, les modifications post-traductionnelles ou les isoformes peuvent produire des bandes supplémentaires. Utilisez des témoins positifs appropriés (par exemple, des lignées cellulaires cancéreuses invasives) et confirmez la spécificité avec des échantillons knockdown ou knockout.
• En immunofluorescence/ICC, l'anticorps devrait marquer les podosomes et les régions cytoplasmiques. Employez des protocoles de fixation et de perméabilisation appropriés, et effectuez une co-coloration avec des marqueurs de podosomes (par exemple, la cortactine) pour confirmer la localisation.
• Pour ELISA, associez cet anticorps à un anticorps de capture si vous concevez un dosage sandwich, et optimisez les conditions de revêtement en utilisant des fragments de SH3PXD2A recombinants.
• En raison de la réactivité croisée avec la souris, vous pouvez valider des modèles utilisant des tissus ou des lignées cellulaires de souris, mais comparez toujours les modèles d'expression avec des bases de données connues.

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