Anticorps monoclonal lapin anti-SFTPD (Protéine du surfactant D) pour WB, ELISA - P35247

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de SFTPD (SP-D)

• La protéine D associée au surfactant pulmonaire (SP-D), codée par le gène SFTPD (également appelé COLEC7, PSPD, SFTP4), est un membre de la famille des collectines appartenant à la superfamille des lectines de type C.
• SP-D joue un rôle essentiel dans la défense immunitaire innée du poumon en se liant aux micro-organismes inhalés, aux antigènes organiques et aux toxines via son domaine de reconnaissance des glucides, et interagit avec les lipopolysaccharides bactériens, les oligosaccharides et les acides gras.
• Cette protéine module la fonction des leucocytes dans les réponses immunitaires et peut participer à la réorganisation ou au renouvellement du surfactant pulmonaire, contribuant ainsi au maintien de l'homéostasie alvéolaire.
• SP-D est une protéine sécrétée localisée dans l'espace extracellulaire et la matrice, particulièrement abondante dans le film de surface pulmonaire où elle est à l'interface des barriques air-liquide.
• L'expression tissulaire de SFTPD est majoritairement détectée dans le poumon, avec une expression additionnelle notée dans le cerveau, le pancréas et les adipocytes matures du tissu adipeux.
• La protéine présente des caractéristiques structurelles incluant un domaine en superhélice, une région de type collagène et des ponts disulfures ; elle subit des modifications post-traductionnelles telles que l'hydroxylation, la glycosylation et la S-nitrosylation, et nécessite du calcium pour son activité lectine.
• SP-D se lie fortement au maltose et à d'autres motifs alpha-glucosyl, ce qui peut faciliter sa reconnaissance des glucides de surface microbienne.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique ; pour le WB, assurez-vous que l'anticorps reconnaît la protéine native entière dans des conditions dénaturantes et réductrices, étant donné le poids moléculaire prédit d'environ 38 kDa (humain). Validez les lysats à partir de tissu pulmonaire ou de lignées cellulaires pertinentes.
• Pour l'ELISA, envisagez d'utiliser la protéine SP-D recombinante ou le peptide comme antigène de revêtement, et testez différentes concentrations d'anticorps pour obtenir une sensibilité optimale. Notez que SP-D est sécrétée, donc les milieux conditionnés ou le liquide de lavage bronchoalvéolaire peuvent servir de sources naturelles d'échantillons.
• Une réactivité croisée avec la souris et le rat a été indiquée ; lorsque vous utilisez ces espèces, vérifiez la taille des bandes en WB, car les orthologues de souris et de rat ont des poids moléculaires similaires mais peuvent présenter de légères différences. Des expériences pilotes avec des contrôles positifs adaptés à l'espèce sont recommandées.
• Comme SP-D contient des domaines lectines dépendants du calcium, la présence de calcium dans les tampons peut affecter la liaison de l'anticorps dans certains formats de test ; envisagez de tester avec et sans chélateurs de calcium si des résultats inconsistants se produisent.

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