Anticorps polyclonal de lapin anti-SETDB1 (validé par KO) pour WB, IF-P, ELISA - Q15047

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de SETDB1

• SETDB1, également connue sous le nom d'ESET ou KMT1E, est une histone-lysine N-méthyltransférase qui triméthyle spécifiquement la lysine 9 de l'histone H3 (H3K9me3), une marque de répression transcriptionnelle. Références connexes : PMID:11959841, PMID:12869583, PMID:14536086
• Elle fonctionne principalement dans l'euchromatine pour silencer les gènes, couplant H3K9me3 à la méthylation de l'ADN par des interactions avec MBD1 et ATF7IP, et cette répression est maintenue de manière héréditaire lors de la réplication de l'ADN via CAF-1. Références connexes : PMID:12869583, PMID:14536086, PMID:27237050
• SETDB1 est recrutée sur la chromatine par TRIM28/KAP1, qui est dirigé par les protéines à doigt de zinc KRAB, et est essentielle pour la formation de l'hétérochromatine médiée par HUSH et le silençage génique. Références connexes : PMID:24623306, PMID:27732843
• Dans les cellules souches embryonnaires, SETDB1 maintient la répression des gènes et des rétrovirus endogènes, coopérant avec TRIM28 pour le dépôt de H3K9me3 indépendamment de la méthylation de l'ADN. Références connexes : PMID:24623306, PMID:37938770
• SETDB1 catalyse également la mono- et la diméthylation de H3K9 dans le cytoplasme sur les histones libres avant l'assemblage de la chromatine. Références connexes : PMID:26405197
• Elle se localise principalement dans le noyau mais se trouve également dans le cytoplasme et s'associe aux chromosomes.
• Un isoforme résultant d'un épissage alternatif manque de domaines clés de méthyltransférase et est catalytiquement inactif.
• Exprimée de manière ubiquitaire avec les niveaux les plus élevés dans les testicules.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à la région N-terminale (acides aminés 1–397) ; l'anticorps peut reconnaître la protéine SETDB1 pleine longueur (~143 kDa) et éventuellement des fragments N-terminaux.
• La validation par KO suggère une haute spécificité ; les chercheurs doivent inclure des témoins de knockout ou de knockdown dans leur configuration expérimentale pour confirmer la spécificité dans leurs propres systèmes.
• Pour le transfert Western (Western blot), utilisez une plage de marqueurs de poids moléculaire élevé et envisagez des temps de transfert longs ou des gels à faible pourcentage pour la protéine de 143 kDa.
• Pour l'immunofluorescence/IF-P, optimisez les protocoles de fixation et de perméabilisation pour détecter SETDB1 nucléaire/chromosomique.
• Dans les tests ELISA, vérifiez la réactivité croisée si vous utilisez des espèces autres que l'humain, la souris ou le rat.

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