Anticorps polyclonal anti-SETD2 pour WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q9BYW2

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de SETD2

• SETD2 est une histone-lysine N-méthyltransférase qui triméthyle spécifiquement la lysine 36 de l'histone H3 (H3K36me3), ce qui en fait l'enzyme principale responsable de cette marque pour l'activation transcriptionnelle épigénétique. Elle peut utiliser l'H3K36 diméthylé comme substrat et également méthyler l'H3K36 non méthylé in vitro. Références associées : PMID:16118227, PMID:19141475, PMID:21526191, PMID:19332550
• Elle joue un rôle essentiel dans la modulation de la structure de la chromatine pendant l'élongation de la transcription en coordonnant le recrutement du complexe FACT et en interagissant avec l'ARN polymérase II hyperphosphorylé (POLR2A). Références associées : PMID:23325844
• Elle agit comme régulateur clé de la réparation des mésappariements de l'ADN en phase G1 et début de phase S : la marque H3K36me3 générée par SETD2 est nécessaire pour recruter la sous-unité MSH6 du complexe MutS alpha sur la chromatine, permettant une identification rapide des mésappariements. Références associées : PMID:23622243
• Elle est requise pour la réparation des cassures double-brin de l'ADN par recombinaison homologue ; elle médie la formation de H3K36me3 sur les sites de cassure pour favoriser le recrutement de RAD51. Références associées : PMID:24843002
• Elle exerce une fonction de suppresseur de tumeur, et la marque H3K36me3 recrute également la méthyltransférase de l'ADN DNMT3A pour maintenir les états hétérochromatiques. Références associées : PMID:24509477, PMID:27317772
• Le recrutement de SETD2 et la formation de H3K36me3 sont améliorés dans les gènes contenant des introns, ce qui suggère un couplage entre l'épissage et l'élongation de la transcription. Références associées : PMID:21792193
• En plus des histones, elle médie la méthylation de l'alpha-tubuline (Lys-40) et de STAT1 (Lys-525), contribuant à la mitose normale, la cytodiérèse et la défense antivirale induite par l'interféron-alpha. Références associées : PMID:27518565, PMID:28753426
• La localisation subcellulaire est principalement nucléaire, associée aux chromosomes. L'expression est ubiquitaire dans tous les tissus.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Pour la détection par western blot (WB), il est recommandé d'utiliser un gel à faible pourcentage (par exemple 6 % ou un gel à gradient) pour séparer efficacement la protéine SETD2 de haut poids moléculaire (~288 kDa).
• En immunohistochimie (IHC-P) et immunofluorescence (IF/ICC), les méthodes standard de récupération d'antigène et de perméabilisation sont généralement nécessaires pour obtenir un signal optimal ; validez le protocole dans votre système d'échantillon adapté.
• Le peptide immunogène correspond à une région C-terminale (aa 2475-2564) de la protéine SETD2 humaine ; bien qu'il y ait une réactivité croisée avec la souris et le rat, confirmez la réactivité pour votre espèce d'intérêt en raison d'éventuelles variations de séquence.
• Pour l'immunoprécipitation (IP), prétraitez les lysats par pré-clarification et incluez des contrôles d'isotype appropriés pour minimiser la liaison non spécifique.
• Incluez toujours des contrôles positifs et négatifs (par exemple des lysats avec des niveaux d'expression de SETD2 connus) pour valider la détection dans votre dispositif expérimental.

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