Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-SERCA2/ATP2A2 pour WB, IHC-P - P16615

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de SERCA2/ATP2A2

• L'ATPase 2 du calcium du réticulum sarcoplasmique/endoplasmique (SERCA2), également connue sous le nom de pompe à calcium 2, est codée par le gène ATP2A2 et appartient à la famille des ATPases de transport de cations de type P. L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes avec une expression spécifique aux tissus.
• SERCA2 est une enzyme dépendante du magnésium qui catalyse l'hydrolyse de l'ATP couplée au translocation des ions calcium du cytosol vers la lumière du réticulum sarcoplasmique ou endoplasmique, essentielle pour l'homéostasie intracellulaire du calcium. Références connexes : PMID:12542527 PMID:16402920
• Cette pompe joue un rôle clé dans le cycle de contraction/relaxation des cellules musculaires en régulant la recapture du calcium dans le réticulum sarcoplasmique.
• Au-delà du muscle, SERCA2 est impliquée dans l'autophagie : lors de son interaction avec VMP1, elle contrôle les contacts entre la membrane du RE et le RE d'isolement nécessaires à la formation des autophagosomes, et module les contacts avec les gouttelettes lipidiques, les mitochondries et les endosomes. Références connexes : PMID:28890335
• Dans les ostéoclastes, SERCA2 agit comme un régulateur de la signalisation calcique médiée par TNFSF11 via son interaction avec TMEM64, favorisant l'activation de NFATC1 et la production de ROS mitochondriales critiques pour la différenciation des ostéoclastes.
• Au niveau subcellulaire, SERCA2 se localise à la membrane du réticulum endoplasmique et à la membrane du réticulum sarcoplasmique, reflétant son rôle dans le stockage et la signalisation du calcium intracellulaire.
• L'expression tissulaire varie : l'isoforme 1 est largement exprimée dans le muscle lisse et les tissus non musculaires (élevée dans le foie, le pancréas, le poumon), tandis que les isoformes 2 et 3 se trouvent principalement dans le muscle cardiaque et le muscle squelettique à contraction lente.
• Les principales modifications post-traductionnelles incluent la liaison des nucléotides, la phosphorylation et les ponts disulfure ; la protéine est également sujette à la nitration, comme l'indiquent plusieurs études phosphoprotéomiques.

Guides Expérimentaux et Conseils Techniques

• Cet anticorps polyclonal a été élevé contre un fragment recombinant couvrant les acides aminés 111-253 du SERCA2/ATP2A2 humain (région conservée). Il peut reconnaître plusieurs isoformes et réagir de manière croisée avec le SERCA2 de souris et de rat, comme cela a été confirmé.
• Pour le Western blot, attendez-vous à une bande autour de 115 kDa. Optimisez les conditions réductrices/non réductrices et envisagez d'utiliser des contrôles de chargement à partir de tissus avec une forte expression de SERCA2 (par exemple, foie, cœur).
• Pour l'immunohistochimie (sections de paraffine), employez des méthodes appropriées de récupération d'antigène et validez la coloration dans les tissus connus pour exprimer SERCA2. Incluez des contrôles de tissus positifs et négatifs.
• Pour les applications ELISA, utilisez l'immunogène recombinant ou la protéine purifiée comme antigène de revêtement. Vérifiez les conditions de revêtement et la série de dilution de l'anticorps.
• Comme pour tout anticorps polyclonal, la cohérence d'un lot à l'autre doit être vérifiée pour les dosages quantitatifs. Envisagez de réaliser des expériences pilotes lors du changement de lots.

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