Anticorps polyclonal de lapin anti-SEC61B pour WB, IF/ICC, ELISA - P60468

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de SEC61B

• SEC61B code pour la sous-unité bêta du complexe translocon SEC61, un composant central de la machinerie de translocation des protéines du réticulum endoplasmique (RE). Références associées : PMID:12475939
• Le complexe SEC61 forme un récepteur de ribosome et un pore à porte dans la membrane du RE, permettant l'importation co-traductionnelle des polypeptides précurseurs contenant un peptide signal. Références associées : PMID:12475939
• Il médie également l'insertion dans la membrane du RE des protéines transmembranaires, travaillant de concert avec le complexe translocon multi-passes (MPT) pour les protéines membranaires à plusieurs domaines transmembranaires. Références associées : PMID:32820719, PMID:36261522
• SEC61B coopère avec la protéine de translocation TRAM1 pour faciliter l'importation des protéines naissantes dans le RE. Références associées : PMID:19121997
• Au niveau subcellulaire, SEC61B est un composant intégral de la membrane du réticulum endoplasmique.
• La protéine subit plusieurs modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation, la palmitoylation et la phosphorylation, qui peuvent réguler son activité ou sa stabilité.
• En tant qu'acteur clé de la translocation des protéines, SEC61B est associée à des processus tels que le transport des protéines, la translocation et l'organisation de la membrane du RE.

Guide expérimental et conseils techniques

• Pour le Western Blot (WB), le poids moléculaire prédit de SEC61B est d'environ 10 kDa. Utilisez un gel SDS-PAGE à 12-15% et optimisez le transfert sur une membrane PVDF avec une taille de pores de 0,2 µm pour les petites protéines. Incluez des contrôles positifs appropriés (par exemple, lysats de cellules HeLa, HEK293 ou de tissus exprimant SEC61B) et validez la spécificité de l'anticorps avec un peptide de blocage ou un échantillon knock-out.
• Pour l'Immunofluorescence/Immunocytochimie (IF/ICC), une fixation au PFA à 4% suivie d'une perméabilisation avec du Triton X-100 à 0,1% est recommandée. Testez la concentration de l'anticorps dans la plage de 1:50 à 1:200 et confirmez la localisation au niveau du RE. Une co-marquage avec un marqueur du RE (par exemple, la calnexine ou la PDI) peut aider à vérifier la spécificité.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être évalué en tant que réactif de capture ou de détection. Titrez l'anticorps pour déterminer la concentration de travail optimale, et validez avec une protéine SEC61B recombinante ou un lysat cellulaire. Assurez-vous de tester la réactivité croisée avec des échantillons de souris et de rat pour confirmer les performances.
• En tant qu'anticorps polyclonal, la cohérence d'un lot à l'autre doit être surveillée. Pensez à aliquoter à la réception et à réaliser une étude pilote pour chaque nouveau lot afin de maintenir la reproductibilité expérimentale.

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