Anticorps monoclonal de lapin anti-SDHB pour WB, IF/ICC, IF-P, IHC-P, ELISA - P21912

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de SDHB

• SDHB code la sous-unité riche en fer et en soufre (Ip) de la succinate déshydrogénase (SDH), également connue sous le nom de complexe II de la chaîne respiratoire mitochondriale.
• Le complexe SDH catalyse l’oxydation du succinate en fumarate dans le cycle de l’acide tricarboxylique (TCA) et transfère les électrons à l’ubiquinone via ses centres fer-soufre (PubMed:26925370, PubMed:27604842). Références associées : PMID:26925370 PMID:27604842
• La protéine coordonne les centres [2Fe-2S], [3Fe-4S] et [4Fe-4S] qui assurent le transport des électrons.
• SDHB est ancré dans la membrane interne de la mitochondrie, son site actif étant orienté vers la matrice.
• Outre le succinate, la SDH peut oxyder le malate en énol-oxaloacétate, qui agit comme un inhibiteur puissant du complexe (par analogie).
• L’acétylation et d’autres modifications post-traductionnelles régulent l’activité de la SDH, et les mutations de SDHB sont associées aux maladies mitochondriales primitives ainsi qu’aux syndromes héréditaires de paragangliome/phéochromocytome (d’après les mots-clés UniProt : variant pathologique, maladie mitochondriale primitive).
• La protéine est également impliquée dans les interactions hôte-virus et constitue une cible pour l’identification protéomique.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène couvre la région N-terminale (aa 29–280) du SDHB humain, qui comprend la protéine mature après le processus mitochondrial. Vérifiez la spécificité de l’anticorps dans des fractions mitochondriales ou sur le complexe II purifié.
• En Western blot, le SDHB migre à environ 31 kDa ; utilisez des conditions réductrices et envisagez d’ajouter des inhibiteurs de protéases pour prévenir la dégradation.
• En immunofluorescence ou en IHC, une perméabilisation est nécessaire pour accéder à la membrane interne mitochondriale ; validez le marquage à l’aide d’un marqueur mitochondrial.
• L’anticorps présente une réactivité croisée avec le SDHB de la souris et du rat ; vérifiez l’homologie de séquence si vous utilisez d’autres espèces.
• Pour l’ELISA, associez-le à un système de capture/détection validé ciblant un épitope non chevauchant si vous développez un dosage sandwich.

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