Anticorps monoclonal anti-SDHA pour WB, IF, ELISA - P31040

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la SDHA

• SDHA code pour la sous-unité flavoprotéique de la succinate déshydrogénase (SDH), un complexe enzymatique (complexe II) de la chaîne de transport d'électrons mitochondriale qui couple l'oxydation du succinate à la réduction de l'ubiquinone (PubMed:10746566, PubMed:24781757).
  Références associées :
  PMID:10746566 PMID:24781757

• La protéine catalyse également l'oxydation du malate en énol-oxaloacétate, un puissant inhibiteur de la SDH qui est ensuite isomérisé en céto-oxaloacétate (Par similarité).

• La SDHA agit comme un suppresseur de tumeur ; les mutations perte de fonction sont associées aux paragangliomes et aux tumeurs stromales gastro-intestinales (PubMed:20484225).
  Références associées :
  PMID:20484225

• Localisée dans la membrane interne mitochondriale, la SDHA est essentielle à la fois pour le cycle de l'acide tricarboxylique et la phosphorylation oxydative.

• Les modifications post-traductionnelles comprennent l'acétylation et la phosphorylation, qui peuvent réguler l'activité enzymatique ; la protéine contient également un cofacteur FAD lié de manière covalente.

• Sur le plan clinique, les mutations de la SDHA sont liées au syndrome de Leigh, à la cardiomyopathie et à d'autres maladies mitochondriales primaires (mots-clés : Variante pathogène, Maladie mitochondriale primaire).

• De multiples variants transcriptionnels codant pour différentes isoformes ont été identifiés (Épissage alternatif).

• La protéine a une masse moléculaire prédite de 72,7 kDa mais migre généralement à ~73 kDa en SDS-PAGE.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à une région C-terminale conservée (aa 550–650), suggérant la reconnaissance de toutes les isoformes connues de la SDHA humaine ; vérifier dans les systèmes d'échantillons pertinents.

• Pour le Western blot, utiliser des conditions réductrices et charger des quantités appropriées de protéines ; la bande attendue est d'environ 73 kDa. Valider avec un contrôle positif tel que des lysats de cellules HeLa ou HEK293.

• Dans les tests d'immunofluorescence, la coloration mitochondriale doit prédominer ; optimiser la fixation (par exemple, PFA 4%) et la perméabilisation (par exemple, Triton X-100 0,1%) pour un meilleur signal.

• Cet anticorps présente une réactivité croisée avec la SDHA de souris et de rat, le rendant adapté aux études chez ces espèces ; confirmer la réactivité dans votre modèle en testant des lysats ou des coupes tissulaires.

• Pour les applications ELISA, envisagez de l'associer à un anticorps de détection reconnaissant un épitope non chevauchant.

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