Anticorps polyclonal de lapin anti-SCAF8 (RBM16) pour WB, ELISA - Q9UPN6

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de SCAF8

• SCAF8 (facteur 8 associé aux protéines SR et au domaine CTD), également connu sous les noms RBM16 ou CCAP7, est une protéine nucléaire de 141 kDa qui agit comme un facteur anti-terminaison lors de la transcription.
• Avec SCAF4, il empêche la terminaison précoce de l’ARNm en inhibant l’utilisation de sites alternatifs de polyadénylation, assurant ainsi la synthèse de transcrits de pleine longueur. Références connexes : PMID:31104839
• SCAF8 s’associe au domaine C-terminal (CTD) phosphorylé de l’ARN polymérase II et se lie à l’ARN naissant en amont des sites précoces de poly(A) afin d’inhiber le clivage et la polyadénylation prématurés. Références connexes : PMID:31104839
• La protéine agit également comme un régulateur positif de l’élongation des transcrits, indépendamment de SCAF4. Références connexes : PMID:31104839
• Au niveau subcellulaire, SCAF8 est localisée dans le noyau et la matrice nucléaire, ce qui concorde avec son rôle dans le traitement co-transcriptionnel de l’ARN.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation et la méthylation, et la protéine subit un épissage alternatif, la formation de liaisons isopeptidiques et une conjugaison de type ubiquitine.
• Elle appartient à la famille des protéines à motif de liaison à l’ARN et contient des domaines impliqués dans la liaison à l’ARN et l’interaction avec le CTD.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène est une protéine de fusion recombinante couvrant les acides aminés 572–634 de SCAF8 humain. Cette région devrait être immunogène ; toutefois, les utilisateurs doivent valider la spécificité de l’anticorps dans leur espèce cible et leur type d’échantillon.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit de SCAF8 est de 141 kDa. Nous recommandons d’utiliser un gel de polyacrylamide à faible pourcentage (par exemple 6–8 %) et de prolonger le temps de transfert afin d’assurer le transfert efficace de cette protéine de haut poids moléculaire.
• Pour les applications ELISA, il est conseillé d’optimiser l’antigène de coating et la dilution de l’anticorps. Envisagez d’utiliser SCAF8 recombinant ou des lysats cellulaires comme contrôles positifs.
• Il est rapporté que cet anticorps polyclonal présente une réactivité croisée avec SCAF8 de souris et de rat. Les utilisateurs doivent vérifier la réactivité lors de l’utilisation d’échantillons provenant d’autres espèces.

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