Anticorps polyclonal anti-SAV1 pour WB, ELISA - Q9H4B6

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de SAV1

• SAV1 (homologue 1 de la protéine Salvador, également appelé hWW45) est une protéine échafaudage de 45 kDa contenant un domaine WW. C'est un composant essentiel de la voie de signalisation Hippo, qui contrôle la taille des organes et supprime la tumorigénèse en couplant la prolifération cellulaire à l'apoptose (PubMed:29063833). Références associées : PMID:29063833
• SAV1 forme un complexe avec les kinases STK3/MST2 et STK4/MST1, facilitant leur activation puis la phosphorylation subséquente du complexe LATS1/2-MOB1. Ce complexe phosphoryle à son tour les co-activateurs transcriptionnels oncogéniques YAP1 et WWTR1/TAZ, et les retient dans le cytoplasme, empêchant leur entrée nucléaire et l'expression de gènes promoteurs de croissance.
• Au-delà de la signalisation Hippo canonique, SAV1 régule la disjonction des centrosomes en contrôlant la localisation de NEK2 sur les centrosomes, influençant la phosphorylation de CROCC et CEP250. Il module également l'activité transcriptionnelle du récepteur alpha des estrogènes (ESR1) via une phosphorylation dépendante de STK3/MST2.
• SAV1 se localise à la fois dans le noyau et le cytoplasme, ce qui est cohérent avec ses doubles rôles dans la régulation transcriptionnelle et de fonction d'échafaudage pour les kinases cytoplasmiques.
• La protéine est exprimée de manière ubiquitaire dans les tissus adultes humains, avec les niveaux les plus élevés dans le pancréas, l'aorte et le septum interventriculaire, et les plus faibles dans le muscle squelettique ; son expression est plus élevée dans le cœur fœtal que dans le cœur adulte, ce qui suggère des rôles développementaux.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation, et la protéine comporte un domaine à bobine superenroulée et des répétitions de domaines WW (mots-clés : Phosphoprotéine, Bobine superenroulée, Répétition, Structure 3D).

Conseils expérimentaux et techniques

• Cet anticorps polyclonal de lapin a été obtenu contre une protéine de fusion recombinante couvrant les acides aminés 199-383 de SAV1 humain (NP_068590.1), qui comprend la région C-terminale contenant le domaine à bobine superenroulée et les répétitions de domaines WW, importants pour les interactions protéine-protéine.
• Pour le Western blot, SAV1 a un poids moléculaire prédit d'environ 45 kDa ; nous recommandons d'utiliser des contrôles de charge appropriés et de confirmer la taille de la bande dans des lysats cellulaires pertinents (par exemple HeLa, HEK293 ou échantillons de tissus de souris).
• Pour l'ELISA, pensez à optimiser la concentration de l'antigène de revêtement et la dilution de l'anticorps en utilisant des protocoles d'ELISA indirect standard.
• Comme l'anticorps réagit de manière croisée avec l'humain et la souris, il est adapté aux études comparatives sur ces espèces ; cependant, une validation dans votre système expérimental spécifique est recommandée.
• À noter que SAV1 est exprimé dans de nombreux tissus, nous vous conseillons donc d'utiliser des lignées cellulaires avec des niveaux d'expression connus comme contrôles positifs.

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