Anticorps polyclonal dirigé contre le domaine RBD de la protéine Spike du SARS-CoV-2 pour WB, IF/ICC, IP, ELISA - P0DTC2

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la glycoprotéine Spike

• La glycoprotéine Spike (S) est une protéine de fusion précurseur qui médie l'entrée virale en se liant au récepteur hôte ACE2 et en déclenchant la fusion membranaire. Références associées : PMID:32142651, PMID:32155444, PMID:33607086
• Après clivage, la sous-unité S2 expose des peptides de fusion pour une fusion directe avec la membrane cellulaire ; alternativement, la Spike non clivée induit l'endocytose et la fusion via la voie endosomiale. Références associées : PMID:34561887, PMID:32075877, PMID:32221306
• D'autres récepteurs hôtes incluent NRP1/NRP2, les intégrines et ASGR1, permettant une entrée indépendante d'ACE2 et contribuant au tropisme tissulaire. Références associées : PMID:33082294, PMID:33082293, PMID:35150743, PMID:34837059
• La protéine S est clivée par les protéases hôtes TMPRSS2 ou cathepsine L (CSTL) lors de l'entrée virale, déclenchant des changements conformationnels irréversibles. Références associées : PMID:32703818, PMID:34159616
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation, les ponts disulfures et la palmitoylation, qui sont essentielles pour la structure et la fonction de la protéine.
• Localisation subcellulaire : membrane du virion, membrane du compartiment intermédiaire entre le réticulum endoplasmique et l'appareil de Golgi de l'hôte, et membrane cellulaire de l'hôte.
• Elle contient un domaine de liaison au récepteur (RBD) au sein de la sous-unité S1 qui interagit directement avec ACE2, ce qui en fait une cible clé pour les anticorps neutralisants.
• Il peut agir comme un superantigène et inhiber les réponses immunitaires innées de l'hôte, contribuant à l'immunoévasion virale.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène comprend le domaine de liaison au récepteur (acides aminés 332-550) de la protéine Spike du SARS-CoV-2, ce qui rend cet anticorps adapté pour détecter le RBD dans des essais tels que le western blotting (WB), l'ELISA et l'immunoprécipitation (IP).
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), nous recommandons de valider l'anticorps sur des lignées cellulaires infectées ou des cellules transfectées pour exprimer la protéine Spike dans des conditions appropriées de fixation et de perméabilisation.
• En tant qu'anticorps polyclonal, il peut reconnaître plusieurs épitopes sur le RBD ; réalisez une titration et incluez des contrôles adaptés (par exemple, lysats cellulaires négatifs, contrôles d'isotype) pour garantir la spécificité.
• La réactivité croisée est rapportée pour le SARS-CoV-2 ; la réactivité avec d'autres coronavirus ou variants doit être confirmée expérimentalement.
• Le poids moléculaire prédit de la protéine Spike entière est d'environ 141 kDa ; cependant, les formes clivées ou glycosylées peuvent migrer différemment ; nous recommandons d'inclure un contrôle positif.

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