Anticorps polyclonal de lapin anti-protéine Spike du SARS-CoV-2 pour WB - P0DTC2

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la protéine Spike du SARS-CoV-2

• La glycoprotéine Spike (S) du SARS-CoV-2, également appelée E2 ou protéine peplomère, est une protéine de fusion virale de classe I qui médie l'entrée du virus dans les cellules hôtes et constitue une cible principale pour les anticorps neutralisants.
• La protéine S attache le virion à la cellule hôte en se liant au récepteur de l'enzyme de conversion de l'angiotensine 2 (ACE2), initiant ainsi l'infection.
  Références associées :
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  PMID:32155444
  PMID:33607086
• Les récepteurs d'entrée alternatifs incluent la neuropiline-1/2 (NRP1/NRP2) et l'intégrine, qui contribuent au tropisme tissulaire ; par exemple, l'utilisation de NRP1/NRP2 explique le tropisme viral dans les cellules épithéliales olfactives à faible expression d'ACE2.
  Références associées :
  PMID:33082294
  PMID:33082293
  PMID:35150743
• Le précurseur complet de la protéine Spike (~141 kDa) est traité par protéolyse en sous-unités S1 et S2. Lors de la liaison au récepteur, le clivage de S2' par des protéases hôtes telles que la TMPRSS2 ou la cathepsine L déclenche des changements conformationnels irréversibles qui fusionnent les membranes virales et cellulaires.
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  PMID:34159616
  PMID:34561887
• La protéine S se localise sur la membrane du virion, la membrane du compartiment intermédiaire réticulum endoplasmique-Golgi (ERGIC) de l'hôte et la membrane cellulaire de l'hôte.
• Les caractéristiques structurelles clés comprennent la glycosylation N-liée, la palmitoylation, une ancre transmembranaire et des répétitions heptades en superhélice stabilisées par des ponts disulfures.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Le peptide immunogène (acides aminés 600–700) couvre la jonction S1/S2 ; par conséquent, l'anticorps peut détecter à la fois la protéine Spike complète (~141 kDa) et la sous-unité S2 dans des conditions réductrices. Envisagez de tester à la fois les conditions réductrices et non réductrices en SDS-PAGE pour le Western blot.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), les conditions de fixation et de perméabilisation doivent être optimisées pour votre lignée cellulaire ou tissu cible, car la localisation de la protéine Spike (surface vs intracellulaire) dépend du contexte d'expression.
• En ELISA, cet anticorps peut être évalué comme réactif de capture ou de détection ; l'appariement avec un anticorps monoclonal anti-Spike peut améliorer la spécificité du test.
• Pour l'immunoprécipitation (IP), validez la capacité de l'anticorps à précipiter les complexes Spike natifs dans le système d'échantillon pertinent, car l'intégrité conformationnelle peut affecter la liaison.
• Le Dot blot (DB) peut servir d'outil de criblage rapide ; cependant, la sensibilité doit être comparée aux méthodes quantitatives comme l'ELISA pour une analyse définitive.
• La réactivité croisée est confirmée pour le SARS-CoV-2 ; la réactivité avec les protéines Spike d'autres coronavirus (par exemple, SARS-CoV, MERS-CoV) n'est pas déterminée et doit être testée si nécessaire.

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