Anticorps polyclonal anti-SARS-CoV-2 Spike ECD pour WB et ELISA - P0DTC2

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la glycoprotéine Spike du SARS-CoV-2

• La glycoprotéine Spike (S, E2, protéine du peplomère) est une protéine de fusion virale de classe I qui médie l'entrée du SARS-CoV-2 dans les cellules hôtes par liaison au récepteur ACE2 (PubMed:32142651, PubMed:32155444, PubMed:33607086). Références associées : PMID:32142651 PMID:32155444 PMID:33607086
• Après la liaison au récepteur, le clivage au niveau du site S2/S2' par les protéases hôtes TMPRSS2 ou la cathepsine L (CSTL) déclenche la fusion membranaire, soit à la surface cellulaire, soit dans les endosomes (PubMed:32142651, PubMed:32703818, PubMed:34159616). Références associées : PMID:32142651 PMID:32703818 PMID:34159616
• La protéine Spike peut également utiliser d'autres récepteurs alternatifs comme NRP1/NRP2 et les intégrines, ce qui contribue au tropisme pour les cellules épithéliales olfactives et aux voies d'entrée indépendantes de l'ACE2 (PubMed:33082293, PubMed:33082294, PubMed:35150743). Références associées : PMID:33082293 PMID:33082294 PMID:35150743
• L'ectodomaine Spike (ECD) comprend la sous-unité de liaison au récepteur S1 et la sous-unité de fusion S2, avec des charnières flexibles dans la tige permettant une orientation dynamique (PubMed:32817270). Références associées : PMID:32817270
• Au niveau sous-cellulaire, la protéine Spike est présente sur la membrane du virion, la membrane du compartiment intermédiaire réticulum endoplasmique-Golgi de l'hôte et la membrane de la cellule hôte.
• La protéine est fortement glycosylée et palmitoylée, et présente des ponts disulfures et des régions en superenroulement caractéristiques du mécanisme de fusion virale.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène était une protéine de fusion recombinante couvrant l'ensemble du domaine extracellulaire (acides aminés 11 à 1208), ce qui rend l'anticorps adapté à la détection des formes complètes et solubles de l'ECD Spike.
• Pour un Western blot en conditions réductrices, nous recommandons d'utiliser un tampon d'échantillon dénaturant avec du β-mercaptoéthanol ou du DTT, car la protéine Spike contient plusieurs ponts disulfures.
• Cet anticorps est validé pour l'ELISA, il est potentiellement adapté pour les tests de capture d'antigène Spike ou de liaison ; l'optimisation des conditions de revêtement et de blocage est recommandée.

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