Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-SARS-CoV-2 NSP15 pour WB, ELISA - P0DTD1

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de NSP15

• La NSP15 est codée par le gène rep du SARS-CoV-2 dans le cadre de la grande polyprotéine ORF1ab (également appelée polyprotéine réplicase 1ab), qui est traitée protéolytiquement en plusieurs protéines non structurelles (NSP) essentielles au cycle viral.
• La NSP15 fonctionne comme une endoribonucléase spécifique aux uridylates (EndoU) qui joue un rôle central dans la transcription et la réplication virales en dégradant les polyuridines 5' générées lors de la réplication de la région poly(A) des ARN génomiques et sous-génomiques viraux. Cette activité empêche l'accumulation d'ARN poly(U) qui, autrement, s'hybriderait avec les queues poly(A) et activerait les capteurs d'ARN double brin de l'hôte, permettant ainsi d'éviter la détection immunitaire innée. Références connexes : PMID:33504779 PMID:33564093
• L'activité endonucléase de la NSP15 empêche l'activation simultanée des capteurs d'ARN double brin de la cellule hôte, notamment MDA5/IFIH1, OAS et PKR, facilitant ainsi l'évasion immunitaire.
• Il a été démontré que la NSP15 se lie à l'ARN double brin génomique en association avec le complexe de réplication-transcription (RTC) et pourrait également contribuer à la transcription discontinue par la nsp12. Références connexes : PMID:34562452 PMID:35706445
• La NSP15 catalyse une réaction en deux étapes : une transsestérification 2'-O générant un phosphate cyclique 2'3', suivie d'une hydrolyse en un phosphate 3'. Références connexes : PMID:33504779 PMID:33564093
• En tant que composant de la polyprotéine réplicase, la NSP15 est localisée dans les organites de réplication cytoplasmiques de l'hôte, y compris les vésicules à double membrane dérivées du réticulum endoplasmique, où la synthèse de l'ARN viral a lieu (par similarité, basé sur les mots-clés de localisation de la polyprotéine).
• La protéine NSP15 est conservée parmi les coronavirus et est considérée comme une cible antivirale attrayante en raison de ses rôles dans la réplication virale et l'évasion immunitaire.

Guides Expérimentaux et Conseils Techniques

• L'immunogène correspond à un peptide synthétique situé dans la région NSP15 (acides aminés 6600-6700 de YP_009724389.1) ; par conséquent, l'anticorps est censé reconnaître la NSP15, mais peut également détecter la polyprotéine ORF1ab non traitée dans les lysats de cellules infectées. Pour le Western blot (WB), envisagez d'utiliser des lysats de cellules infectées par le SARS-CoV-2 et de valider le profil des bandes avec des témoins appropriés.
• Pour l'ELISA, immobilisez la protéine NSP15 recombinante ou le peptide d'immunisation, et optimisez les conditions de revêtement et les dilutions d'anticorps. Comme il s'agit d'un anticorps polyclonal, la cohérence d'un lot à l'autre doit être vérifiée.
• La réactivité croisée avec d'autres coronavirus ou des protéines de l'hôte n'a pas été testée ; validez dans votre système expérimental spécifique si nécessaire.

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