Anticorps monoclonal Anti-SARS-CoV-2 3CLpro pour WB, IF/ICC, ELISA - P0DTC2

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la glycoprotéine Spike

• La glycoprotéine Spike (S) est une protéine de fusion de classe I trimérique qui médie l'entrée virale en se liant au récepteur hôte l'enzyme de conversion de l'angiotensine 2 (ACE2) (PubMed:32142651, PubMed:32155444, PubMed:33607086). Références associées : PMID:32142651 PMID:32155444 PMID:33607086
• Après liaison au récepteur, la protéine S subit un clivage protéolytique au niveau du site S2' par les protéases hôtes telles que TMPRSS2 ou la cathepsine L, ce qui déclenche des changements conformationnels irréversibles qui induisent la fusion membranaire (PubMed:32142651, PubMed:32703818, PubMed:34159616, PubMed:34561887). Références associées : PMID:32142651 PMID:32703818 PMID:34159616 PMID:34561887
• La protéine Spike est également capable d'utiliser d'autres récepteurs pour entrer dans la cellule, notamment la neuropiline-1 (NRP1) et la neuropiline-2 (NRP2), ce qui peut contribuer à l'infection des cellules épithéliales olfactives à faible expression d'ACE2 (PubMed:33082294, PubMed:33082293). Références associées : PMID:33082294 PMID:33082293
• De plus, le récepteur 1 de l'asialoglycoprotéine (ASGR1) peut servir de récepteur alternatif indépendamment de l'ACE2 (PubMed:34837059). Références associées : PMID:34837059
• La protéine S se localise sur la membrane du virion et est également présente dans le compartiment intermédiaire réticulum endoplasmique-Golgi (ERGIC) de l'hôte et sur la membrane cellulaire de l'hôte pendant l'infection.
• Elle contient deux régions répétées heptadiques (HR1 et HR2) qui forment une structure en faisceau de six hélices essentielle pour la fusion membranaire ; la protéine est fortement glycosylée et comporte plusieurs liaisons disulfure et sites de palmitoylation.
• La protéine Spike agit également comme superantigène et inhibe les réponses immunitaires innées de l'hôte, notamment par antagonisme de la tetherine, contribuant à l'évasion immunitaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot (WB), une bande d'environ 34 kDa (monomère de 3CLpro) peut être observée ; il est recommandé d'utiliser des inhibiteurs de protéases pendant la préparation des échantillons pour empêcher la dégradation de la protéase virale.
• En immunofluorescence (IF/ICC), assurez une fixation et une perméabilisation adéquates pour détecter la 3CLpro cytoplasmique dans les cellules infectées par le SARS-CoV-2 ; validez l'expérience dans des lignées cellulaires contrôle positif appropriées.
• Les applications ELISA peuvent nécessiter une titration de l'anticorps et de l'antigène recombinant 3CLpro ; envisagez un format ELISA sandwich pour obtenir une sensibilité élevée.
• En raison de la conservation de la séquence, la réactivité croisée avec la 3CLpro d'autres coronavirus ne peut pas être exclue ; vérifiez la spécificité dans le système d'échantillon concerné.

CamelBio : votre pont d'approvisionnement tout-en-un

CamelBio propose aux fabricants de diagnostics, aux laboratoires et aux instituts de recherche une voie simplifiée pour l'approvisionnement en matières premières pour le diagnostic in vitro (IVD), notamment des paires d'anticorps validées, des anticorps monoclonaux/polyclonaux et des réactifs auxiliaires en vrac. Dans le cadre de notre portefeuille pour la recherche sur les maladies infectieuses, cet anticorps anti-3CLpro du SARS-CoV-2 soutient le développement d'essais liés à la COVID-19. Contactez notre équipe pour un approvisionnement personnalisé de cibles rares ou pour un conseil technique, du concept à la phase clinique.