Anticorps monoclonal lapin anti-S100P pour WB, IF/ICC et ELISA - P25815

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de S100P

• S100P est un membre de la famille des protéines liant le calcium S100 possédant des motifs EF-hand, également connue sous le nom de MIG9 (protéine du gène 9 induisant la migration) et S100E.
• Elle agit comme un capteur calcique, modulant la signalisation calcique cellulaire en interagissant avec des effecteurs en aval tels que EZR (ezrine) et PPP5C (sérine/thréonine-protéine phosphatase 5).
• Elle joue un rôle dans la formation des microvillosités des cellules épithéliales et peut réguler la dynamique du cytosquelette au niveau du cortex cellulaire.
• Elle stimule la prolifération cellulaire de manière autocrine par activation du récepteur des produits de glycation avancée (RAGE), contribuant potentiellement à la croissance tumorale.
• Elle se localise dans le noyau, le cytoplasme et les projections cellulaires, notamment les membranes des microvillosités, ce qui reflète ses rôles dynamiques dans la signalisation.
• Distribution tissulaire : largement exprimée, avec des niveaux plus élevés dans le placenta, le cœur, les poumons, le muscle squelettique, la rate et les leucocytes ; elle est notamment surexprimée dans les adénocarcinomes canalaire du pancréas et les néoplasies intraépithéliales pancréatiques.
• Les noms alternatifs (MIG9, S100E) suggèrent une implication dans la migration cellulaire et la biologie épithéliale.
• Le poids moléculaire théorique est d'environ 10,4 kDa, ce qui correspond à la bande d'environ 10 kDa observée en Western blot.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est une protéine de fusion recombinante couvrant les acides aminés 1 à 95, incluant les domaines EF-hand N-terminaux. La liaison de l'anticorps peut être sensible aux changements conformationnels induits par le calcium ; il est recommandé de réaliser des expériences en présence et en absence de calcium pour évaluer l'accessibilité de l'épitope.
• Pour le Western blot, attendez une bande proche de 10 kDa. Utilisez une gamme de marqueurs de bas poids moléculaire et envisagez un gel SDS-PAGE à 15 % ou un gel à gradient pour une résolution optimale des petites protéines.
• Pour l'IF/ICC, S100P se localise à la fois dans le noyau et le cytoplasme, avec un enrichissement au niveau des projections membranaires. Validez l'anticorps sur des modèles de lignées cellulaires adaptés tels que les cellules de cancer du pancréas (par exemple PANC-1, BxPC-3) où l'expression est élevée.
• Pour l'ELISA, utilisez la S100P humaine recombinante comme contrôle positif. Assurez-vous que le tampon de revêtement et les conditions de lavage sont compatibles avec la stabilité des protéines liant le calcium.
• Incluez des contrôles négatifs appropriés (par exemple des lysats tissulaires de cerveau ou de testicule, où S100P est peu ou pas exprimé) pour confirmer la spécificité.

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