Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-S100A8 pour WB, IHC-P, ELISA - P27005

Spécifications et Paramètres Essentiels du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de S100A8

• La S100A8 est une petite protéine liant le calcium et le zinc (10295 Da) appartenant à la famille S100, également connue sous le nom de calgranuline-A, MRP-8, p8 et CP-10.
• Elle joue un rôle prépondérant dans la régulation des processus inflammatoires et des réponses immunitaires innées, principalement en induisant le chimiotactisme et l'adhésion des neutrophiles.
• Intracellulairement, en tant que partie du complexe S100A8/A9 (calprotectine), elle facilite le trafic de l'acide arachidonique dans les leucocytes, module la réorganisation du cytosquelette dépendante de la tubuline lors de la migration des phagocytes, et active la NADPH-oxydase en favorisant l'assemblage du complexe enzymatique et en transférant l'acide arachidonique au complexe.
• Extracellulairement, la S100A8 agit comme une alarmine ou une molécule DAMP, se liant aux récepteurs de reconnaissance de motifs tels que TLR4 et AGER, ce qui déclenche les voies de signalisation MAP kinase et NF-κB pour amplifier les cascades pro-inflammatoires ; elle possède également une activité antimicrobienne directe via la chélation du Zn²⁺.
• La protéine peut induire la mort cellulaire par autophagie et apoptose via un dialogue croisé entre les mitochondries et les lysosomes impliquant les ROS et BNIP3, et elle régule la survie des neutrophiles via les voies ITGAM/ITGB et TLR4-médiées par MEK-ERK.
• Selon les mots-clés UniProt et les données fonctionnelles, la S100A8 est impliquée dans les événements de S-nitrosylation en tant que partie du complexe transnitrosylase iNOS-S100A8/A9, contribuant à la modification sélective de sites sur les protéines cibles.
• Au niveau subcellulaire, la S100A8 se trouve dans le cytoplasme, associée au cytosquelette, à la membrane cellulaire, et est également sécrétée dans l'espace extracellulaire.

Guide Expérimental et Conseils Techniques

• L'immunogène utilisé était une protéine recombinante couvrant les acides aminés 1-89 de la S100A8 de souris (NP_038678.1). Étant donné que cette séquence correspond à presque la protéine entière (poids moléculaire prédit ~10 kDa), l'anticorps devrait reconnaître la forme native. Pour le Western blot, attendez-vous à une bande autour de 10–12 kDa ; la réduction et la dénaturation peuvent aider à exposer pleinement l'épitope.
• En tant qu'anticorps polyclonal, il peut présenter de légères variations d'un lot à l'autre ; envisagez de valider les performances avec un contrôle positif connu tel qu'un lysat de moelle osseuse ou de rate de souris, ou des cellules stimulées pour exprimer la S100A8 (par exemple, macrophages traités au LPS).
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), les conditions de démasquage antigénique (par exemple, démasquage thermique avec tampon citrate pH 6.0) doivent être optimisées, et une inactivation de la peroxydase endogène peut être nécessaire. Vérifiez la réactivité croisée avec les tissus de rat comme indiqué.
• Dans les applications ELISA, utilisez de la S100A8 recombinante pour le coating ou adoptez un format sandwich avec une paire d'anticorps appariés ; confirmez la spécificité avec des contrôles négatifs appropriés.

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