Anticorps monoclonal de lapin anti-RXRα pour WB, IP, IF/ICC, ChIP, ChIP-seq, ELISA - P19793

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de RXRα

• RXRα (récepteur de l'acide rétinoïque RXR-alpha) est un récepteur nucléaire codé par le gène RXRA, également désigné NR2B1. Il appartient à la superfamille des récepteurs nucléaires et fonctionne comme facteur de transcription dépendant du ligand qui se lie à l'acide 9-cis rétinoïque avec une forte affinité. PubMed:1310260 Références associées : PMID:1310260

• Dans le noyau, RXRα forme des hétérodimères avec les récepteurs de l'acide rétinoïque (RAR) et se lie aux éléments de réponse à l'acide rétinoïque (RARE) composés de sites tandem 5'-AGGTCA-3' (DR1-DR5). En l'absence de ligand, les hétérodimères RXR-RAR recrutent des complexes corépresseurs qui favorisent la désacétylation des histones et la condensation de la chromatine, réprimant la transcription. La liaison du ligand déclenche la dissociation des corépresseurs et le recrutement de coactivateurs, conduisant à l'activation transcriptionnelle. PubMed:10195690, PubMed:11162439, PubMed:11915042, PubMed:20215566, PubMed:37478846, PubMed:9267036 Références associées : PMID:10195690 PMID:11162439 PMID:11915042 PMID:20215566 PMID:37478846 PMID:9267036

• RXRα agit comme partenaire hétérodimérique commun pour de nombreux autres récepteurs nucléaires, notamment PPARα. L'hétérodimère RXRA/PPARA est essentiel à l'activité transcriptionnelle de PPARα sur les gènes de l'oxydation des acides gras comme ACOX1 et les gènes du système cytochrome P450. PubMed:10195690, PubMed:11915042, PubMed:28167758 Références associées : PMID:10195690 PMID:11915042 PMID:28167758

• La localisation subcellulaire inclut le noyau, où il exerce ses fonctions de régulation transcriptionnelle, ainsi que le cytoplasme et les mitochondries. Son trafic navette peut faciliter l'import nucléaire de partenaires d'hétérodimérisation comme VDR et NR4A1. PubMed:12145331, PubMed:15509776 Références associées : PMID:12145331 PMID:15509776

• RXRα subit de multiples modifications post-traductionnelles incluant l'acétylation, la phosphorylation et l'ubiquitination (formation de liaison isopeptidique). Ces modifications régulent sa stabilité, son affinité de liaison à l'ADN et son activité transcriptionnelle. Mots-clés : Acétylation, Phosphoprotéine, Conjugaison Ubl, Liaison isopeptidique.

• Outre la régulation métabolique, RXRα joue un rôle dans l'immunité innée en régulant négativement les gènes antiviraux comme les IFN de type I, atténuant ainsi les réponses immunitaires lors d'une infection virale. Il favorise également la phagocytose des débris de myéline et la remyélinisation dans les macrophages. PubMed:25417649, PubMed:26463675 Références associées : PMID:25417649 PMID:26463675

• L'expression tissulaire est large : fortement exprimé dans le foie, le rein et le cerveau ; également détecté dans les fibroblastes pulmonaires et les monocytes. Son rôle dans la sénescence cellulaire est lié à la répression d'ITPR2 et à la régulation de la signalisation calcique. PubMed:30216632, PubMed:26463675, PubMed:14702039, PubMed:2159111, PubMed:24275569 Références associées : PMID:30216632 PMID:26463675 PMID:14702039 PMID:2159111 PMID:24275569

• L'hétérodimère RXRα/RARB peut agir à la fois comme répresseur ou activateur transcriptionnel selon le contexte de l'élément d'ADN RARE, ce qui illustre son rôle polyvalent dans la régulation génique. PubMed:29021580 Références associées : PMID:29021580

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond à la région N-terminale (aa 1-100) du RXRα humain, un domaine impliqué dans la transactivation dépendante du ligand et possiblement dans les interactions avec les corégulateurs. Cette stratégie de conception peut conférer une haute spécificité et affinité pour les formes non modifiées et post-traductionnellement modifiées du récepteur.

• L'anticorps est validé pour le Western blotting (WB) pour détecter une bande à 51 kDa. Compte tenu de l'expression ubiquitaire de RXRα dans le foie, le rein et le cerveau, ces tissus constituent des contrôles positifs adaptés. Pour l'immunoprécipitation (IP), il est recommandé d'utiliser des extraits nucléaires de cellules cultivées ou d'échantillons tissulaires.

• En immunoprécipitation de la chromatine (ChIP) et ChIP-seq, RXRα est recruté sur les RARE à l'échelle du génome. Un locus de contrôle positif bien caractérisé est le gène du récepteur bêta de l'acide rétinoïque (RARB), qui contient un RARE DR5 canonique. Pour obtenir de meilleurs résultats, traitez les cellules avec de l'acide 9-cis rétinoïque ou de l'acide tout-trans rétinoïque avant la réticulation.

• Pour l'immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), l'anticorps peut être utilisé pour surveiller la translocation nucléaire de RXRα après stimulation par le ligand. Une co-coloration avec un marqueur nucléaire ou des marqueurs d'organites (par exemple, un colorant mitochondrial) peut fournir un contexte de localisation supplémentaire.

• Lors d'un ELISA sandwich, l'association de cet anticorps monoclonal avec un anticorps de détection polyclonal dirigé contre un épitope distinct peut améliorer la sensibilité. Validez le test en utilisant des standards de protéine RXRα recombinante et vérifiez la réactivité croisée avec d'autres isoformes de RXR (RXRβ, RXRγ) si nécessaire.

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