Anticorps monoclonal de lapin anti-RUVBL1/TIP49A/PONTIN pour WB, IHC-P, ELISA, ChIP - Q9Y265

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de RUVBL1/TIP49A/PONTIN

• RUVBL1 est un membre de 50 kDa de la famille des ATPases AAA+ qui fonctionne comme une ATPase stimulée par l'ADN simple brin et une hélicase ADN 3'→5', la formation d'un anneau hexamérique étant critique pour son activité enzymatique. Références associées : PMID:17157868, PMID:33205750
• Il sert de composant central des complexes de remodelage de la chromatine INO80 et SWR1-like, présentant une activité ATPase stimulée par les nucléosomes et un glissement de nucléosomes dépendant de l'ATP ; il fait également partie du complexe histone acétyltransférase NuA4 qui acétyle les histones H4 et H2A. Références associées : PMID:16230350, PMID:21303910, PMID:14966270, PMID:24463511
• Joue un rôle essentiel dans la transformation oncogénique par MYC et module l'activation transcriptionnelle via la voie LEF1/TCF1-β-caténine. Références associées : PMID:10882073, PMID:16014379
• Nécessaire à la prolifération cellulaire, soulignant son rôle fondamental dans la progression du cycle cellulaire. Références associées : PMID:14506706
• Se localise dans de multiples compartiments subcellulaires, y compris le noyau (nucléoplasme, matrice nucléaire), le cytoplasme, le centrosome et la membrane cellulaire, et s'associe aux particules axonémales de la dynéine.
• Modifié post-traductionnellement par acétylation, formation de liaison isopeptidique et conjugaison de type ubiquitine, ce qui peut réguler ses fonctions diverses.
• Peut se lier au plasminogène à la surface cellulaire et améliorer son activation, suggérant un lien avec la protéolyse extracellulaire. Références associées : PMID:11027681
• Exprimé de manière ubiquitaire, avec les niveaux les plus élevés dans le cœur, le muscle squelettique et les testicules.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre la région C-terminale (aa 350 456), ce qui peut fournir une spécificité d'épitope distale des domaines ATPase conservés, réduisant potentiellement la réactivité croisée avec des membres de famille proches comme RUVBL2.
• Pour le Western blot, une bande unique à ~50 kDa est attendue ; valider dans le lysat cellulaire approprié (par exemple, HeLa, HEK293) et optimiser les conditions de blocage et de détection.
• Pour l'IHC-P, envisager une récupération antigénique par la chaleur (par exemple, tampon citrate, pH 6,0) et vérifier la localisation nucléaire attendue.
• Pour le ChIP, la quantité d'anticorps et les conditions de réticulation nécessitent une optimisation empirique ; l'anticorps peut être adapté pour enrichir les régions génomiques associées aux complexes INO80 ou NuA4.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat permet des applications dans des modèles rongeurs, mais l'intensité du signal et le fond doivent être titrés.

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