Anticorps polyclonal de lapin anti-RUFY3 pour WB et ELISA - Q7L099

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de RUFY3

• RUFY3 (également connu sous les noms RIPX, SINGAR1 et ZFYVE30) est une protéine contenant les domaines RUN et FYVE qui agit comme effecteur de la petite GTPase ARL8. Elle joue un rôle essentiel dans la liaison des endolysosomes au complexe moteur dynéine-dynactine pour le transport rétrograde le long des microtubules. Dans les cellules non neuronales, cette activité concentre les endolysosomes dans la région juxtanucléaire, tandis que dans les neurones de l’hippocampe, elle favorise le transport rétrograde des endolysosomes des axones vers le soma. Références associées : PMID:35314674
• Cette protéine est impliquée dans la formation de la polarité neuronale et la croissance axonale ; elle pourrait inhiber la formation d’axones supplémentaires en supprimant l’activité de PI3K dans les prolongements neuronaux mineurs (par similarité).
• RUFY3 participe à l’organisation du cytosquelette en modulant la localisation subcellulaire de FSCN1 et de DBN1 au niveau des cônes de croissance axonaux. Elle favorise également la formation de structures protrusives enrichies en F-actine à la périphérie cellulaire, contribuant ainsi à la migration et à l’invasion cellulaires. Références associées : PMID:25766321
• Au niveau subcellulaire, RUFY3 se localise dans le cytoplasme, le système endomembranaire et divers prolongements cellulaires, notamment les invadopodes, les cônes de croissance, les filopodes et les lamellipodes ; elle est également présente dans le péricaryon et les lysosomes.
• L’analyse de l’expression tissulaire révèle une surexpression au niveau protéique dans les cellules et les tissus du cancer gastrique, ce qui suggère un rôle oncogénique potentiel.
• Cette protéine fait l’objet d’un épissage alternatif et est régulée par phosphorylation ; elle est classée parmi les mots-clés suivants : jonction cellulaire, protéine du développement, neurogenèse et oncogène.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond à la région N-terminale (acides aminés 1 à 65) de RUFY3 humain ; cette région pourrait être conservée entre les espèces, ce qui explique la réactivité croisée observée avec la souris et le rat, mais une validation expérimentale dans l’espèce cible est recommandée.
• Pour le Western blot, une bande d’environ 53 kDa est attendue sur la base du poids moléculaire calculé ; envisagez d’utiliser des contrôles positifs appropriés, tels que des lignées cellulaires neuronales ou cancéreuses humaines, et vérifiez la spécificité, notamment en raison de la présence potentielle d’isoformes issues de l’épissage alternatif.
• Pour les applications ELISA, optimisez l’antigène de revêtement et les conditions de détection afin de garantir la linéarité et la sensibilité ; l’immunogène recombinant peut servir de standard pour l’étalonnage de l’essai.
• Lors de l’étude de RUFY3 dans des systèmes neuronaux, tenez compte du fait que son activité est couplée à ARL8 liée au GTP ; les essais fonctionnels peuvent nécessiter la coexpression ou la stimulation des voies de transport endolysosomal.

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