Anticorps monoclonal lapin anti-RSK2 / RPS6KA3 pour WB, IHC-P, ELISA - P51812

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de RSK2

• RSK2 (Ribosomal protein S6 kinase alpha-3), également appelée RPS6KA3, p90RSK3, MAPKAPK1B et ISPK-1, est une sérine/thréonine protéine kinase codée par le gène RPS6KA3 situé sur le chromosome X humain. Elle appartient à la famille des kinases AGC et contient deux domaines kinase reliés par une région de liaison.
• Agissant en aval de la cascade de signalisation ERK/MAPK, RSK2 phosphoryle directement le facteur de transcription CREB1 et l'histone H3 au niveau du Ser-10 après stimulation par l'EGF, déclenchant l'expression des gènes précoces immédiats (PubMed:10436156, 9770464).
  Références associées : PMID:10436156 PMID:9770464
• RSK2 promeut la survie cellulaire en phosphorylant et inactivant les facteurs pro-apoptotiques BAD et DAPK1, supprimant ainsi leurs fonctions apoptotiques (PubMed:16213824).
  Références associées : PMID:16213824
• Par la phosphorylation de la protéine ribosomale S6 (RPS6) et du facteur d'initiation de la traduction EIF4B, RSK2 améliore la traduction dépendante de la coiffe en réponse à l'insuline et aux mitogènes (PubMed:17360704, 18508509, 18813292).
  Références associées : PMID:17360704 PMID:18508509 PMID:18813292
• RSK2 intègre les signaux nutritionnels et de croissance en phosphorylant TSC2 et RPTOR, régulateurs clés de mTORC1, modulant ainsi la signalisation mTOR indépendamment de la voie PI3K/AKT (PubMed:18722121).
  Références associées : PMID:18722121
• Localisée à la fois dans le noyau et le cytoplasme, RSK2 est exprimée dans de nombreux tissus, avec les niveaux les plus élevés dans le muscle squelettique.
• Les mutations du gène RPS6KA3 sont associées au syndrome de Coffin-Lowry (CLS), un handicap intellectuel lié à l'X caractérisé par un retard psychomoteur et des anomalies squelettiques.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 600-700 de RSK2 humain, une région conservée chez l'homme, la souris et le rat, ce qui explique la réactivité croisée observée. Pour le Western blot, une bande d'environ 84 kDa est attendue ; envisagez d'utiliser des échantillons réduits et de charger 20 à 30 µg de lysat cellulaire. Validez la spécificité de la bande à l'aide de contrôles positifs appropriés (par exemple cellules HeLa, A431 ou NIH/3T3) et de contrôles négatifs (par exemple lysats de RSK2 knock-out ou échantillons traités par siRNA).
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), un démasquage antigénique par chauffage avec un tampon citrate (pH 6,0) est recommandé. Réalisez un titrage de l'anticorps primaire en commençant par une dilution 1:50-1:200, et optimisez la détection avec un système HRP à base de polymère. Incluez systématiquement des contrôles d'isotype et des coupes de tissus connus pour exprimer RSK2.
• Pour les applications ELISA, envisagez de revêtir le plaque avec la protéine ou le peptide RSK2 recombinant et utilisez un protocole ELISA indirect standard. La concentration de travail optimale de l'anticorps doit être déterminée expérimentalement par titrage en échiquier.

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