Anticorps polyclonal anti-RPRD1B pour WB, IHC-P, ELISA - Q9NQG5

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de RPRD1B

• RPRD1B (également connu sous le nom de CREPT, « Cell cycle-related and expression-elevated protein in tumor ») est une protéine nucléaire qui régule la transcription en interagissant avec le domaine C-terminal (CTD) phosphorylé de la sous-unité POLR2A de l’ARN polymérase II.
• Elle participe à la déphosphorylation du CTD via RPAP2 et augmente l’expression de CCND1 (cycline D1) en favorisant la liaison de l’ARN polymérase II au promoteur de CCND1.
• RPRD1B empêche l’ARN polymérase II de dépasser le site de terminaison en 3’, et pourrait faciliter son recyclage vers le promoteur par la formation de boucles de chromatine.
• Elle augmente également l’expression d’autres gènes liés au cycle cellulaire, tels que CDK2, CDK4, CDK6 et la cycline E, sans toutefois affecter CDKN1A, CDKN1B ou la cycline A.
• Localisée exclusivement dans le noyau, RPRD1B est une phosphoprotéine et une protéine acétylée, selon les identifications protéomiques.
• Elle est exprimée préférentiellement dans divers tissus tumoraux (côlon, poumon, foie, sein, prostate, estomac, endomètre utérin et cancers du col de l’utérus), à des niveaux supérieurs à ceux des tissus non tumoraux adjacents, ce qui suggère un rôle dans la prolifération et l’oncogenèse.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène couvre les acides aminés 80 à 326 de la RPRD1B humaine ; l’anticorps polyclonal peut reconnaître plusieurs épitopes dans cette région. Pour les contrôles positifs, il est recommandé d’utiliser une protéine recombinante pleine longueur ou des lysats de lignées cellulaires humaines, murines ou de rat.
• En Western blot, une bande proche de 37 kDa est attendue. Validez la spécificité avec des conditions appropriées de blocage et de détection, et incluez des marqueurs de poids moléculaire.
• Pour l’IHC-P, une récupération antigénique peut être nécessaire. Effectuez un test sur des tissus tumoraux connus pour surexprimer RPRD1B (par exemple, des cancers du côlon ou du sein) et incluez un contrôle négatif afin de confirmer la spécificité de la coloration.
• Cet anticorps peut être utilisé en ELISA ; pour les formats de capture/détection, l’association avec un anticorps monoclonal de haute affinité peut améliorer la sensibilité.

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