Anticorps polyclonal de lapin anti-RPN1 pour WB, ELISA - P04843

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la RPN1

• La RPN1, également connue sous le nom de ribophorine I (RPN-I) ou sous-unité de 67 kDa de la dolichyl-diphosphooligosaccharide--protéine glycosyltransférase, est une sous-unité centrale du complexe oligosaccharyltransférase (OST).
• Le complexe OST catalyse le transfert initial d'un glycane défini (Glc3Man9GlcNAc2) du dolichol-pyrophosphate vers les résidus asparagine au sein des motifs consensus Asn-X-Ser/Thr, ce qui constitue la première étape de la N-glycosylation des protéines (PMID:31831667). Références associées : PMID:31831667
• La N-glycosylation se produit de manière co-traductionnelle, et le complexe OST s'associe au complexe translocon Sec61 au niveau de la membrane du réticulum endoplasmique (RE).
• La RPN1 est une protéine membranaire intégrale localisée dans la membrane du RE et a également été identifiée dans les mélanosomes.
• Elle est exprimée dans tous les tissus testés, ce qui indique un rôle ubiquitaire dans la synthèse des glycoprotéines.
• Toutes les sous-unités du complexe OST sont nécessaires pour une activité enzymatique maximale, soulignant le rôle essentiel de la RPN1 dans l'efficacité de la N-glycosylation.
• La protéine est soumise à des modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation et l'ubiquitination, et contient un peptide signal ainsi qu'une hélice transmembranaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène utilisé pour générer cet anticorps correspond à la région N-terminale (acides aminés 22-350) de la RPN1 humaine. Cette région est en grande partie luminale et devrait permettre de reconnaître la protéine native dans sa conformation localisée au RE.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est de 68 kDa. Utilisez des conditions réductrices et des contrôles de charge appropriés. Validez avec des lysats de contrôle positif provenant de lignées cellulaires humaines, murines ou de rat (par exemple, HeLa, HEK293, NIH/3T3).
• En ELISA, cet anticorps peut être utilisé pour la détection directe ou la capture de la protéine RPN1 recombinante ; envisagez de tester contre la séquence de l'immunogène ou la protéine entière.
• Une réactivité croisée avec la RPN1 de souris et de rat a été observée lors de la validation par le fournisseur, mais il est conseillé de confirmer les performances spécifiques à l'espèce dans votre système expérimental.
• Lors de l'utilisation pour la détection de la RPN1 endogène, notez que la protéine est largement exprimée ; cependant, les niveaux d'expression peuvent varier. Une optimisation de la dilution de l'anticorps peut être nécessaire.

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