Anticorps polyclonal anti-RPE65 pour WB et ELISA - Q16518

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de RPE65

• RPE65, également connue sous le nom de rétinoïde isomérohydrolase, p63, BCO3, LCA2, RP20, rd12, mRPE65 et sRPE65, est une enzyme clé du cycle visuel.
• Elle catalyse le clivage isomérohydrolase des esters de tout-trans-rétinyle en 11-cis-rétinol, une étape critique dans la régénération du chromophore visuel 11-cis-rétinal. Références associées : PMID:16116091
• RPE65 est essentielle à la production de 11-cis rétinal pour les photorécepteurs à bâtonnets et à cônes, comme démontré dans des études fonctionnelles. Références associées : PMID:17848510
• L'enzyme présente également une activité isomérase envers la lutéine, la convertissant en méso-zéaxanthine, un caroténoïde spécifique à l'œil. Références associées : PMID:28874556
• Au niveau subcellulaire, RPE65 se localise dans le cytoplasme, la membrane cellulaire et les membranes microsomales, son association membranaire étant régulée par palmitoylation.
• Son expression est hautement spécifique à l'épithélium pigmentaire rétinien (EPR) au niveau protéique.
• Les mutations du gène RPE65 sont liées à des dystrophies rétiniennes héréditaires, notamment l'amaurose congénitale de Leber de type 2 (LCA2) et la rétinite pigmentaire de type 20 (RP20).
• Les modifications post-traductionnelles telles que l'acétylation, la palmitoylation et la phosphorylation jouent un rôle important dans la modulation de son activité et de son trafic subcellulaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 340–440 de la RPE65 humaine, une région bien conservée entre l'homme et la souris, ce qui explique probablement la réactivité croisée observée. Les utilisateurs doivent vérifier la réactivité avec d'autres espèces si nécessaire par alignement de séquences.
• Pour le Western Blot (WB), le poids moléculaire prédit est de 61 kDa. Incluez des contrôles positifs appropriés (par exemple, des lysats d'épithélium pigmentaire rétinien) et optimisez les conditions de blocage pour minimiser les bandes non spécifiques.
• Pour l'ELISA, cet anticorps polyclonal peut être exploré comme réactif de capture ou de détection. Un titrage dans le tampon de dosage spécifique est recommandé pour déterminer la concentration de travail optimale.
• Comme RPE65 est une protéine associée à la membrane, envisagez d'utiliser des tampons de lyse contenant des détergents doux (tels que 0,1 % de Triton X-100 ou NP-40) pour améliorer l'efficacité de l'extraction des protéines pour les applications en aval.

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